ZARAGOZA METHOD OF CONSERVATION OF MICROORGANISMS

The present invention relates to a novel methodology for the cryopreservation of microorganisms that includes the storage of bacteria in contact with a cryopreservation agent, evaluating the stability of a transformed bacterial strain over a prolonged period, cultured an adjusted, then cryopreserved and stored at different temperatures. Also, said method analyzes the stability of the biochemical identity of the transformed bacterial strain, performing biochemical tests, such as Gram stain, SIM Medium, MV-RP, Simmons Citrate, Kligler Iron Agar, EMB Agar, TSI Agar, and Sugar Fermentation. Further, it performs PCR assays to determine the stability of the plasmid inserted therein, thus demonstrating that cryopreserved bacteria maintain their biochemical structure after prolonged storage. La presente invención comprende una novedosa metodología de criopreservación de microorganismos que comprende el almacenaje de bacterias en contacto con un agente de criopreservación. Se evaluó la estabilidad de una cepa bacteriana transformada durante un periodo prolongado. Las bacterias se cultivaron y ajustaron, posteriormente, se criopreservaron y almacenaron a diferentes temperaturas. Se analizó la estabilidad de la identidad bioquímica de la cepa bacteriana transformada, se realizaron las pruebas bioquímicas: Tinción Gram, SIM Medio, MV-RP, Citrato de Simmons, Kligler Hierro Agar, Agar EMB, TSI Agar y Fermentación de azúcares. Además, para determinar la estabilidad del plásmido que se encuentra insertado en esta cepa bacteriana, se realizaron ensayos de PCR. De manera inesperada, los resultados demuestran que las bacterias criopreservadas mantienen su estructura bioquímica después de un tiempo prolongado de almacenaje.