APTAMEROS WITH AMEBICIDE ACTIVITY AND THEIR USE AS BIOMARKERS

The present invention relates to the treatment of human amoebiasis caused by the Protozoan Entamoeba Histolytica, which involves Metronidazole, a compound that presents adverse side effects, thereby making it necessary to search for new control methods. Herein, the EhCFIm25 protein represents a target since its absence causes the death of the parasite. The process consists of using the systematic evolution of ligands by exponential enrichment, identifying two aptamers of single-stranded RNA with an affinity for EhCFIm25: SEQ ID NO.1 and SEQ ID NO.2. Also, using RNA electrophoretic mobility retardation assays confirms that both aptamers specifically recognize recombinant EhCFlm25 but not a mutant protein that differs from the wild one by a single amino acid. Further, it recognizes the endogenous EhCFIm25 protein in extracts from trophozoites of E. Histolytica, but not homologous proteins from other organisms. Finally, said treatment inhibits the proliferation of the parasite and causes its death. Said results open the possibility of using aptamers SEQ ID NO.1 and SEQ ID NO.2 as a biomarker or molecular tool, thus developing novel methods of diagnosis or treatment of human amoebiasis. El tratamiento de la amibiasis humana causada por el protozoario Entamoeba histolytica involucra principalmente el Metronidazol, un compuesto que presenta efectos secundarios adversos, por lo que se requiere buscar nuevos métodos de control. En ese contexto, la proteína EhCFIm25 representa un blanco interesante ya que su ausencia provoca la muerte del parásito. Mediante la técnica de evolución sistemática de ligandos por enriquecimiento exponencial, se identificaron dos aptámeros de ARN de cadena sencilla con afinidad para EhCFIm25: SEC ID NO. 1 y SEC ID NO. 2. Mediante ensayos de retardamiento de la movilidad electroforética del ARN, se confirmó que ambos aptámeros reconocen específicamente la EhCFlm25 recombinante pero no una proteína mutante que difiere de la silvestre por un solo amino acido; también reconocen la proteína EhCFIm25 endógena en extractos proteicos de trofozoítos de E. histolytica, pero no proteínas homologas de otros organismos. Finalmente, el tratamiento de los trofozoítos con los aptámeros inhibe de manera significativa la proliferación del parásito y provoca su muerte. Estos resultados abren la posibilidad del uso de los aptámeros SEC ID NO. 1 y SEC ID NO. 2 como biomarcador o herramienta molecular para desarrollar nuevos métodos de diagnóstico o tratamien