Manufacturing method and usage of conditioned media which contains highly effective exosomes secreted by umbilical cord blood stem cells at high content

본 발명은 제대혈 줄기세포가 분비하는 엑소좀 함유 배양액 제조 방법에 관한 것이다. 상기 제조방법은 제대혈 줄기세포를 GDF-11, EGF, FGF2, TFG-β1, 및/또는 VEGF이 첨가된 무혈청 배지에서 배양하는 것을 기본으로 한다. 제대혈 줄기세포에 5종의 성장인자를 첨가한 무혈청 배지를 처리하여 생산한 배양액과 해당 배양액에서 분리한 엑소좀을 성장인자 없이 무혈청 배지만 처리한 경우와 비교했을 때 성장인자가 포함된 배양액 내의 총단백질 함량과 세포외기질 단백질 함량이 높은 배양액을 생산한다. 또한, 5종의 성장인자 포함 무혈청 배지에서 배양된 제대혈 줄기세포가 분비한 엑소좀은 개수가 많아 농도가 높고 크기가 작고 고른 분포도를 보인다. 본 발명에 따라 제조되는 제대혈 줄기세포 배양액은 고효능 엑소좀을 고함량으로 함유하여 피부재생 및/또는 항염증 효능이 높아, 피부 투과가 필요한 피부 도포용 화장료 조성물 및 상처치료용 약학 조성물로 유용하게 사용될 수 있다. The present invention relates to a method for preparing a culture medium containing exosomes released by umbilical cord blood stem cells. The preparation method is based on culturing the umbilical cord blood stem cells in a serum-free medium supplemented with GDF-11, EGF, FGF2, TFG-β1, and/or VEGF. The culture medium produced by treating umbilical cord blood stem cells with a serum-free medium supplemented with 5 types of growth factors and the exosomes isolated from the culture medium has a higher total protein content and extracellular matrix protein content, when compared to a culture medium produced by culturing umbilical cord blood stem cells in a serum-free medium to which the growth factor is not added. In addition, exosomes released by umbilical cord blood stem cells cultured in a serum-free medium containing five growth factors have a high concentration, a small size, and an even distribution.The umbilical cord blood stem cell culture medium prepared according to the present invention contains a high content of high-potency exosomes and has a high skin regeneration and/or anti-inflammatory effect, so it can be used in a cosmetic composition for skin application requiring skin penetration and a pharmaceutical composition for wound treatment.