대량 병렬 핵산 시퀀싱 라이브러리를 생성하기 위한 조성물 및 방법

5'에서 3'으로, 단독중합체-혼성화 영역, 및 5'-(λ)nNm-3'을 포함하는 앵커 영역을 포함하는, 시퀀싱 라이브러리를 생성하는 데 사용하는 올리고뉴클레오티드 프라이머 및 방법이 본 개시의 양태에 따라 제공되며, 상기 단독중합체-혼성화 영역은 5 내지 20개의 요소의 연속한 서열이고, 상기 요소는 뉴클레오티드 또는 Tm 증가 뉴클레오티드 유사체이고, 상기 요소 중 적어도 4개는 Tm 증가 뉴클레오티드 유사체이고, 상기 단독중합체-혼성화 영역은 표적 핵산의 상보적 단독중합체 트랙에 혼성화하고, 상기 상보적 단독중합체 트랙은 상보적 요소의 연속한 서열을 포함하고, λ는 상보적 단독중합체 트랙의 상보적 요소에 상보적인 뉴클레오티드 또는 뉴클레오티드 유사체가 아닌 것을 전제로 λ는 임의의 뉴클레오티드 또는 뉴클레오티드 유사체이며, N은 임의의 뉴클레오티드 또는 뉴클레오티드 유사체이다. Oligonucleotide primers and methods of use in producing sequencing libraries are provided according to aspects of the present disclosure which include, from 5′ to 3′, a homopolymer-hybridizing region, and an anchor region comprising 5′-(λ)nNm-3′, wherein the homopolymer-hybridizing region is a contiguous sequence of 5 to 20 elements, wherein the elements are nucleotides or Tm increasing nucleotide analogs, wherein at least 4 of the elements are Tm increasing nucleotide analogs, wherein the homopolymer-hybridizing region hybridizes to a complementary homopolymer tract of a target nucleic acid, wherein the complementary homopolymer tract comprises a contiguous sequence of complementary elements, wherein λ is any nucleotide or nucleotide analog with the proviso that λ is not a nucleotide or nucleotide analog complementary to a complementary element of the complementary homopolymer tract, and wherein N is any nucleotide or nucleotide analog.