저온, 넓은 pH 범위 및 염의 고농도에서 활성인, 신규 비특이적 열불안정성 뉴클레아제

본 발명의 주제는 어려운 반응 조건(특히, 단백질 및 바이러스의 정제 공정에서 일반적으로 사용되는 고농도의 염 및 기타 첨가제, 저온 및 넓은 범위의 pH)에서 높은 촉매 활성을 나타내는 신규 열불안정성 PPR 뉴클레아제 또는 이의 효소 활성 단편이며, 여기서 뉴클레아제 서열은 SEQ.2 또는 이와 적어도 40%의 동일성을 공유하는 서열이다. 본 발명의 주제는 또한 PPR 뉴클레아제 또는 이의 효소 활성 단편을 인코딩하는 유전자; PPR 뉴클레아제 또는 이의 효소 활성 단편을 인코딩하는 핵산 입자; PPR 인코딩 유전자의 서열을 포함하는 발현 플라스미드; 대장균 JM109(DE3) pD454-PPR-AmpR 및 대장균 ArcticExpress(DE3) pD454-PPR-AmpR의 재조합 균주; PPR 뉴클레아제 단백질 생산 방법, DNA 함량이 상당히 낮은 재조합 단백질을 정제하는 과정에서의 PPR 뉴클레아제의 응용이다. 그뿐만 아니라, 관련 유전학적 분석의 더 높은 민감도 및 특이성을 수득하기 위한, PCR, qPCR, RT-PCR, RT-qPCR, RCA, LAMP 및 NGS용 반응성 시약 및 혼합물의 오염제거; 바이러스 벡터 정제(특히, 현대 유전자 및 세포 요법(키메라 항원 수용체[CAR] T-세포 면역 치료법)에서 사용되는 렌티바이러스[LV], 아데노바이러스[AV, AAV] 및 레트로바이러스[RV]) 공정에서의 PPR 뉴클레아제의 응용; 치료 또는 진단 목적을 위한 엑소좀 정제 공정에서의 PPR 뉴클레아제의 응용; 특히 효소, 항체, 백신접종 항원, 세포 요법에 사용되는 생성물들 및 기타 치료 단백질의 재조합 단백질 정제 공정에서의 PPR 뉴클레아제의 응용이다. The subject matter of this invention is a new thermolabile PPR nuclease or its enzymatically active fragment exhibiting high catalyst activity in difficult reaction conditions (particularly high concentrations of salts and other additives commonly used in the processes of the purification of proteins and viruses, low temperatures and wide range of pH), where the nuclease sequence is SEQ. 2 or a sequence that shares at least 40% of its identity. The subject matter of the invention is also the gene encoding PPR nuclease or its enzymatically active fragment; a particle of nucleic acid encoding the PPR nuclease or its enzymatically active fragment; expression plasmid including the sequence of the PPR encoding gene; recombinant strains of Escherichia coli JM109(DE3) pD454-PPR-AmpR and E. coli ArcticExpress (DE3) pD454-PPR-AmpR; the method of PPR nuclease protein production, application of PPR nuclease in processes of purification of recombinant proteins of significantly lower DNA content. As well as for decontamination of reactive reagents and mixtures for PCR, qPCR, RT-PCR, RT-qPCR, RCA, LAMP and NGS in order to obtain higher sensitivity and specificity of relevant genetic analyses; application of the PPR nuclease in processes of virus vector purification (particularly lentiviruses [LV], adenoviruses [AV, AAV] and retroviruses [RV] used in modern gene and cell therapies (chimeric antigen receptor [CAR] T-cell immunotherapy)); application of the PPR nuclease in exosome purification processes for therapeutic or diagnostic purposes; application of the PPR nuclease in processes of recombinant protein purification, particularly enzymes, antibodi