복합 샘플로부터의 핵산 단리 및 억제제 제거

본 개시내용은 하기 단계를 포함하는, 샘플로부터 핵산을 단리하는 방법을 제공한다: (a) 샘플, 샘플의 용해물, 용해물의 상청액, 또는 상기 샘플, 용해물 또는 상청액의 일부를 1종 이상의 제1 작용제 (예를 들어, 단백질 침전 작용제) 및 1종 이상의 제2 작용제 (예를 들어, 억제제 제거 작용제)와 접촉시켜 혼합물을 수득하는 단계, (b) 단계 (a)의 혼합물을 고체 상 및 액체 상으로 분리하며, 여기서 1종 이상의 제2 작용제가 주로 고체 상에 존재하는 것인 단계, 및 (c) 단계 (b)의 액체 상으로부터 핵산을 단리하는 단계...

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Hauptverfasser: CALLAHAN HEATHER, DEFORCE EMELIA, NIECIECKI VICTORIA, ADAMS EDDIE W
Format: Patent
Sprache:kor
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Beschreibung
Zusammenfassung:본 개시내용은 하기 단계를 포함하는, 샘플로부터 핵산을 단리하는 방법을 제공한다: (a) 샘플, 샘플의 용해물, 용해물의 상청액, 또는 상기 샘플, 용해물 또는 상청액의 일부를 1종 이상의 제1 작용제 (예를 들어, 단백질 침전 작용제) 및 1종 이상의 제2 작용제 (예를 들어, 억제제 제거 작용제)와 접촉시켜 혼합물을 수득하는 단계, (b) 단계 (a)의 혼합물을 고체 상 및 액체 상으로 분리하며, 여기서 1종 이상의 제2 작용제가 주로 고체 상에 존재하는 것인 단계, 및 (c) 단계 (b)의 액체 상으로부터 핵산을 단리하는 단계. 이러한 방법에 유용한 조성물 및 키트가 또한 개시된다. 추가로 개시되는 것은 1종 이상의 상대적으로 온화한 카오트로픽 작용제 및 1종 이상의 포스페이트를 포함하는 용해 시약을 사용하여 샘플, 특히 복합 샘플, 예컨대 토양 또는 분변 샘플로부터 용해물을 제조하기 위한 방법, 조성물 및 키트이다. The present disclosure provides methods for isolating nucleic acids from a sample, comprising: (a) contacting a sample, a lysate of the sample, a supernatant of the lysate, or a portion of the sample, the lysate or the supernatant with one or more first agents (e.g., protein precipitating agents) and one or more second agents (e.g., inhibitor removing agents) to generate a mixture, (b) separating the mixture of step (a) into a solid phase and a liquid phase, wherein the one or more second agents are primarily in the solid phase, and (c) isolating nucleic acids from the liquid phase of step (b). Compositions and kits useful in such methods are also disclosed. Further disclosed are methods, compositions and kits for preparing a lysate using a lytic reagent comprising one or more relatively mild chaotropic agents and one or more phosphates from a sample, especially a complex sample, such as a soil or stool sample.