Protein interaction mediated selective infection of bacteriophage and there use of

PURPOSE: A method for analysis of protein interaction using the protein interaction mediated selective infection of bacteriophage is provided, thereby rapidly analyzing the protein interaction by simple operation, identifying and isolating a specific protein binding protein in organisms, and identif...

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Hauptverfasser: KANG, WON HWA, SIM, CHAN SEOP, JUNG, YONG HAK
Format: Patent
Sprache:eng ; kor
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Zusammenfassung:PURPOSE: A method for analysis of protein interaction using the protein interaction mediated selective infection of bacteriophage is provided, thereby rapidly analyzing the protein interaction by simple operation, identifying and isolating a specific protein binding protein in organisms, and identifying disease target gene. CONSTITUTION: A method for analysis of protein interaction using the protein interaction mediated selective infection of bacteriophage comprises the steps of: (a) substituting the C-terminal region of TolA protein gene with a gene encoding a target protein, transforming Escherichia coli with a C-terminal substituted TolA protein gene containing vector, and expressing the target protein on the surface of E. coli; (b) substituting the N1-region of g3p gene with a gene encoding the target protein and expressing the fusion protein of the target protein and g3p protein on the surface of bacteriophage; (c) treating the target protein surface-expressing E. coli with the fusion protein surface-expressing bacteriophage; and (d) measuring the formation of plaque or colony. 본 발명은 박테리오파아지의 숙주세포 감염이 박테리오파아지와 숙주세포의 표면에 각각 발현 전시된 이종 또는 동종 단백질간의 특이적 결합을 매개로 선택적으로 유도되는 시스템을 이용하여 단백질간의 상호작용을 간단히 분석할 수 있는 방법에 관한 것이다. 더욱 자세하게, 본 발명은 박테리오파아지가 숙주세포인 대장균을 감염시키는 과정에서 대장균의 내막단백질인 TolA 단백질과 박테리오파아지의 g3p 코트단백질이 서로 특이적으로 결합하는 것에 착안하여 TolA 단백질의 C-말단에 목적단백질 (bait protein)을 치환하여 융합시키고 g3p 단백질의 N-말단에 표적단백질 (target protein)을 치환하여 융합시켜 표면발현한 후 두 단백질간의 결합이 일어나는 경우에만 박테리오파아지가 대장균을 선택적으로 감염시키는 시스템을 사용하는 방법에 관한 것이다.