SYNTHETIC GENE BANK OF HUMAN ANTIBODY AND PREPARATION THEREOF

본 발명은 합성 사람 항체(huAb) 또는 항원-결합 영역을 함유하는 항체 부분의 유전자 뱅크의 제조방법 및 용도에 관한 것이다. 적합한 벡터내 huAb 프레임워크(framework)를 출발물질로 하여, 거의 "무작위로" 조합한 올리고뉴클레오타이드에 의하여 항체 cDNA의 초가변 영역을 형성시킨다. 올리고 뉴클레오타이드를 합성하는 도중 적절한 뉴클레오타이드의 선택시에는 초가변영역내의 상대적으로 보존된 이미노산들이 고려되어야 하고 이와 마찬가지로 사용된 뉴클레오타이드의 비율도 넌센스 코돈이 많아야 매 89번째 위치에...

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Hauptverfasser: IRISU, KLEWINGUHAUSE, THOMAS, SEEHAUS, STEPHAN, DUBEL, FRANK, BERTHOLD BREITLING, MELVIN, LITTLE
Format: Patent
Sprache:eng ; kor
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Beschreibung
Zusammenfassung:본 발명은 합성 사람 항체(huAb) 또는 항원-결합 영역을 함유하는 항체 부분의 유전자 뱅크의 제조방법 및 용도에 관한 것이다. 적합한 벡터내 huAb 프레임워크(framework)를 출발물질로 하여, 거의 "무작위로" 조합한 올리고뉴클레오타이드에 의하여 항체 cDNA의 초가변 영역을 형성시킨다. 올리고 뉴클레오타이드를 합성하는 도중 적절한 뉴클레오타이드의 선택시에는 초가변영역내의 상대적으로 보존된 이미노산들이 고려되어야 하고 이와 마찬가지로 사용된 뉴클레오타이드의 비율도 넌센스 코돈이 많아야 매 89번째 위치에서 나타나도록 선택한다. 당해 합성 huAb cDNA를 미생물 발현 시스템, 예를 들면, 후술되는 이. 콜라이내 벡터 pFMT중에서 발현시킴으로써 합성 huAb 라이브러리를 시험관내에서 이용할 수 있는 선택된 항원을 사용하여 스크린하기 위한 포괄적인 레퍼토리로 사용할 수 있게 된다. Synthetic human antibody libraries are constructed by'generation of random sequences for the hypervariable regions under the restrictions (a) or (e), batch A or batch B according to Table 1 and subsequent insertion into an expression vector' (sic). Synthetic human antibody libraries can be produced by using almost randomly synthesised oligonucleotides coding for each of the three hypervariable regions in the variable parts of the heavy and light chains (regions CDR1, CDR2 and CDR3).