METHODS FOR PRODUCING CAR-T CELLS, CARRIERS AND KITS FOR INTRODUCING NUCLEIC ACID

To provide methods for producing CAR-T cells capable of easily and efficiently introducing a CAR gene into T cells, and obtaining CAR-T cells expressing CAR gene in a high level, carriers and kits for introducing nucleic acids.SOLUTION: According to one embodiment, there is provided a method of prod...

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Hauptverfasser: AKABOSHI HIDEKAZU, MORITA DAISUKE, ISHIHARA MITSUKO, NAKAZAWA YOZO
Format: Patent
Sprache:eng ; jpn
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Beschreibung
Zusammenfassung:To provide methods for producing CAR-T cells capable of easily and efficiently introducing a CAR gene into T cells, and obtaining CAR-T cells expressing CAR gene in a high level, carriers and kits for introducing nucleic acids.SOLUTION: According to one embodiment, there is provided a method of producing a CAR-T cell (a genetically modified T cell expressing a chimeric antigen receptor (CAR)). This method comprises a stimulation step to stimulate a cell population containing T cells with an antibody that activates T cells; a gene introduction step where the cell population is brought into contact with a nucleic acid-introducing carrier comprising lipid particles, and a first nucleic acid containing the CAR gene and a second nucleic acid containing a transposase gene, contained in the lipid articles; and a culturing step to culture the cell population after the gene introduction step.SELECTED DRAWING: Figure 5 【課題】 本発明は、簡単な手順でCAR遺伝子をT細胞により効率よく導入することができ、且つCAR遺伝子の発現量の多いCAR−T細胞を得ることができるCAR−T細胞の製造方法、核酸導入キャリア及びキットを提供することを目的とする。【解決手段】 実施形態に従う方法は、キメラ抗原受容体(CAR)を発現する遺伝子改変T細胞(CAR−T細胞)を製造する方法である。本方法は、T細胞を含む細胞集団を、T細胞を活性化する抗体で刺激する刺激工程、刺激工程の後、細胞集団に、脂質粒子と、脂質粒子に内包された、CAR遺伝子を含む第1核酸及びトランスポゼース遺伝子を含む第2核酸とを含む核酸導入キャリアを接触させる遺伝子導入工程、及び遺伝子導入工程の後、細胞集団を培養する培養工程を含む。【選択図】 図5