Preparing array of oligonucleotides or peptides by chemical synthesis, useful e.g. for detecting mutations, comprises a network of wells on a support surface
Preparing (M1) a support (I) carrying, on at least one surface, several poly- (or preferably oligo-) nucleotides and/or peptides (A), preferably different, with each (A) being able to couple to its complement by specific-binding interaction and prepared by chemical synthesis in presence of volatile...
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Format: | Patent |
Sprache: | eng ; fre |
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Zusammenfassung: | Preparing (M1) a support (I) carrying, on at least one surface, several poly- (or preferably oligo-) nucleotides and/or peptides (A), preferably different, with each (A) being able to couple to its complement by specific-binding interaction and prepared by chemical synthesis in presence of volatile solvents. (I) comprises several surfaces in which the surface has a network of wells for local attachment and/or synthesis of specific (A). (I) is placed in a reaction chamber (5) and this is saturated with the vapor of volatile solvent(s) used in synthesis of (A), particularly by circulating a flow of the vapor. Attachment/chemical synthesis of (A) is performed in at least one well by applying, the appropriate specific reactants locally and separately to each well, applying collectively (not locally) those reactants common to all wells and, before each localized application, removing at least part of the liquid already present in the relevant well. The wells are prepared by applying a crosslinkable resin, crosslinking the resin with light in specific regions so as to define wells, and removing non-crosslinked resin to produce a square pattern of resin, forming the walls of the wells. Independent claims are also included for the following: (1) a device for performing M1; (2) (I) produced by the new method; and (3) detecting and/or identifying target sequences using (I).
L'invention concerne la fabrication de microcapteurs ( " puces " ) électroniques pour l'analyse de séquences nucléotidiques et/ ou peptidiques. Le but est de fixer à la surface de ces " puces " un très grand nombre de séquences sondes différentes, de manière aisée et économique. Le procédé de fabrication de réseaux de séquences sondes sur un support par ancrage et/ ou synthèse chimique localisé (s) en présence de solvants volatils. Selon ce procédé, on met en oeuvre un support sur lequel est réalisé un quadrillage de puits réactionnels en résine photoréticulée (époxy). On place ensuite le support dans une enceinte réactionnelle que l'on sature à l'aide de vapeurs du solvant de synthèse (acétonitrile). On réalise enfin l'ancrage et éventuellement la synthèse chimique localisé (s) in situ des séquences sondes dans les puits en mettant en oeuvre une alimentation localisée en liquides / réactifs dans chaque puits correspondant à une séquence-sonde donnée, en alimentant collectivement les puits en liquides / réactifs communs et en faisant en sorte que préalablement à chaque opération d'alimentation lo |
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