Detección de ciclos de amplificación múltiples

Procedimiento para identificar una pluralidad de organismos en una muestra, que comprende proporcionar una muestra que ha sido obtenida de un sujeto, proporcionar una pluralidad de pocillos de muestra, cada pocillo de muestra provisto de una porción de la muestra y de cebadores para amplificar una secuencia de ácido nucleico diana de una diferente de la pluralidad de organismos, someter simultáneamente la pluralidad de pocillos de muestra a condiciones de amplificación a través de un número de ciclos de amplificación para identificar organismos de título más alto, detectar si se ha producido la amplificación en cada uno de un primer conjunto de la pluralidad de pocillos de muestra, someter simultáneamente la pluralidad de pocillos de muestra a condiciones de amplificación a través de un número de ciclos de amplificación adicionales para identificar organismos de título más bajo,- detectar si se ha producido la amplificación en cada uno de un segundo conjunto de la pluralidad de pocillos de muestra, identificar al menos un organismo presente en la muestra mediante la identificación de al menos un pocillo de muestra correspondiente en el que se ha producido la amplificación, en el que la primera etapa de detección no implica detectar si se ha producido la amplificación en el segundo conjunto de la pluralidad de pocillos de muestra y la segunda etapa de detección no implica detectar si se ha producido la amplificación en el primer conjunto de la pluralidad de pocillos de muestra, caracterizándose en que el número de ciclos de amplificación realizados antes de las etapas de detección se ajusta individualmente al título del organismo diana y/o al riesgo de un falso positivo inesperado. Methods and devices are provided for simultaneously amplifying a plurality of sample wells for a predetermined amount of amplification, detecting whether amplification has occurred in a first set of the wells, amplifying for an additional amount of amplification and detecting whether amplification has occurred in a second set of the wells. Methods are also provided for analyzing a target nucleic acid sequence using melt curves that were generated in a plurality of amplification cycles.