Aislamiento de ácidos nucleicos
Un procedimiento para aislar un ácido nucleico diana humano a partir de una muestra de heces humanas, comprendiendo el procedimiento: a) eliminar un inhibidor de ensayo de dicha muestra de heces para producir una preparación de muestra clarificada, en el que la eliminación de dicho inhibidor de ensa...
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Format: | Patent |
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Zusammenfassung: | Un procedimiento para aislar un ácido nucleico diana humano a partir de una muestra de heces humanas, comprendiendo el procedimiento: a) eliminar un inhibidor de ensayo de dicha muestra de heces para producir una preparación de muestra clarificada, en el que la eliminación de dicho inhibidor de ensayo a partir de dicha muestra comprende: a1) homogeneizar dicha muestra de heces para producir un homogenado; a2) centrifugar dicho homogenado para producir un sobrenadante. a3) tratar dicho sobrenadante con una polivinilpirrolidona insoluble para unir el inhibidor, si está presente, en un complejo de inhibidor; y a4) asilar dicho comprende de inhibidor a partir de dicho sobrenadante para producir una preparación de muestra clarificada; b) capturar dicho ácido nucleico diana a partir de dicha preparación de muestra clarificada con un reactivo de captura específico de la diana para formar un complejo de captura en el que la captura de dicho ácido nucleico diana comprende: b1) exponer dicha preparación de muestra clarificada a una condición desnaturalizante para producir una muestra desnaturalizada; y b2) unir dicho ácido nucleico diana a un reactivo de captura específico de la diana para formar un complejo de captura, en el que dicho reactivo de captura específico de la diana comprende un oligonucleótido unido a una partícula magnética, el oligonucleótido complementario a al menos una porción de dicho ácido nucleico diana; b3) aislar dicho complejo de captura a partir de dicha preparación de muestra clarificada; y b4) recuperar dicho ácido nucleico diana a partir de dicho complejo de captura en una solución de ácido nucleico.
Provided herein is technology relating to isolating nucleic acids. In particular, the technology relates to methods and kits for extracting nucleic acids from problematic samples such as stool. |
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