Método de secuenciación

Un dispositivo microfluido para secuenciar un ácido nucleico caracterizado por que comprende: - una primera zona en la que el analito está contenido y se digiere progresivamente en una corriente de sus nucleótidos individuales constituyentes, en el que la primera zona comprende un medio para digerir progresivamente el analito; - una ruta microfluida primaria conectada a la primera zona adaptada para permitir el paso de un disolvente portador que contiene una corriente ordenada de microgotas acuosas primarias, al menos algunas de las cuales contienen uno de los nucleótidos individuales; - una segunda zona dispuesta dentro de la ruta microfluida primaria y que comprende un inyector de microgotas y un medio de coalescencia para coalescer secuencialmente microgotas acuosas secundarias de una ruta microfluida secundaria a las microgotas acuosas primarias en la corriente ordenada para formar gotículas secundarias; - una tercera zona dispuesta dentro de la ruta microfluida primaria y que comprende un inyector de microgotas y medios de coalescencia para coalescer secuencialmente microgotas acuosas terciarias de una ruta microfluida terciaria para coalescer con las gotículas acuosas secundarias en la corriente ordenada para formar gotículas terciarias; - un cartucho conectado a la ruta microfluida primaria en la que se almacenan las microgotas terciarias acuosas; - una fuente de luz para interrogar a las microgotas aguas abajo de la ruta microfluida primaria y - un fotodetector para la detección de fluorescencia. Disclosed is a microfluidic device for sequencing a nucleic acid characterised by comprising: €¢ a first zone in which the analyte is contained and progressively digested into a stream of its constituent single nucleotides; €¢ a primary microfluidic pathway connected to the first zone adapted to allow passage of a carrier solvent containing an ordered stream of primary aqueous microdroplets at least some of which contain one of the single nucleotides; €¢ a second zone disposed within the primary microfluidic pathway and comprising a microdroplet injector and/or a coalescence means for sequentially coalescing secondary aqueous microdroplets from a secondary microfluidic pathway into the primary aqueous microdroplets in the ordered stream; €¢ a storage zone connected to the primary microfluidic pathway downstream of the second zone(s) where the primary aqueous microdroplets are stored; €¢ a light source for interrogating the microdroplets at one or more loca