Complejo enzimático de enzimas de Trichoderma Reesei y P. Funiculosum

Un complejo enzimático que tiene actividad beta-1,4-endoglucan hidrolasa que comprende: a. un producto de fermentación de Trichoderma reesei; y b. un producto de fermentación de Penicillium funiculosum que comprende una o más enzimas seleccionadas de una xilanasa (EC 3.2.1.8), una celulasa (EC 3.2.1.4) y una beta-glucanasa (EC 3.2.1.6); en donde la relación de la actividad beta-1,4-endoglucan hidrolasa de Penicillium funiculosum y de Trichoderma reesei es de 0,25/0,75 a 0,35/0,65 y en donde la actividad beta-1,4-endoglucan hidrolasa del complejo enzimático se mide usando el siguiente ensayo: una unidad de actividad de celulasa se define como la cantidad de enzima que produce 1 mmol de equivalentes de glucosa por minuto en las condiciones del ensayo (pH 5,0) y 50ºC; El complejo enzimático se diluye en muestras y se hace una curva estándar de glucosa usando concentraciones de glucosa de 0, 0,125, 0,25, 0,375 y 0,5 mg/ml; Se mezclan 0,25 ml de solución de enzima con 1,75 ml de solución de sustrato (solución de carboximetilcelulosa (CMC) al 1,5% p/v en tampón acetato sódico 0,1 M, pH 5,0) a 50ºC y la reacción se detiene después de 10 min mediante la adición de una solución de ácido 3,5-dinitrosalicílico (DNS) (20 g/l de DNS en tampón que contiene 32 g/l de pellets de hidróxido sódico y 600 g/l de tartrato de sodio y potasio (+)). A esto le sigue el calentamiento a 95ºC durante 5 minutos; La densidad óptica se mide a 540 nm (OD540 nm). La actividad enzimática se determina a partir de la curva estándar. La actividad se calcula como sigue: