Purificación de proteínas

Un método para purificar un polipéptido de una composición que comprende el polipéptido y contaminantes, comprendiendo dicho método las etapas secuenciales de: (a) cargar la composición en una resina de intercambio iónico con un tampón de equilibrado que tiene una primera concentración de sal; (b) lavar la resina de intercambio iónico con un tampón de lavado hasta que se mide una concentración de proteína predeterminada en el flujo a través, en donde la concentración de sal del tampón de lavado aumenta desde una segunda concentración inicial de sal, que es mayor que la concentración de sal del tampón de equilibrado, hasta una tercera concentración final de sal y en donde la concentración predeterminada de proteína corresponde a una DO de 0,6 medida a 280 nm; (c) hacer pasar un volumen fijo de 0,4 a 1 volumen de columna de tampón de lavado a la tercera concentración final de sal sobre la resina de intercambio iónico; y (d) eluir el polipéptido de la resina de intercambio iónico con tampón de elución que tiene una concentración de sal que es mayor que la concentración final de sal del tampón de lavado. A method for purifying a polypeptide by ion exchange chromatography is described in which a gradient wash is used to resolve a polypeptide of interest from one or more contaminants