Procedimiento para obtener líneas celulares de mieloma de mamífero recombinantes adaptadas al crecimiento en medios sin suero ni proteínas

Procedimiento para producir anticuerpo monoclonal humanizado hR3 dirigido contra el receptor de EGF o fragmentos de éste en medios sin suero ni proteínas que comprende adaptar una línea celular de mieloma de mamífero recombinante transfectada con una secuencia que codifica dicho anticuerpo monoclona...

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Hauptverfasser: Perez Rodriguez, Rolando, Castillo Vitlloch, Adolfo, Rojas Del Calvo, Luis, Boggiano Ayo, Tammy, Vitores Sarazola, Svieta
Format: Patent
Sprache:spa
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Beschreibung
Zusammenfassung:Procedimiento para producir anticuerpo monoclonal humanizado hR3 dirigido contra el receptor de EGF o fragmentos de éste en medios sin suero ni proteínas que comprende adaptar una línea celular de mieloma de mamífero recombinante transfectada con una secuencia que codifica dicho anticuerpo monoclonal humanizado hR3 dirigido contra el receptor de EGF o fragmentos de éste, a un crecimiento en medio sin suero ni proteínas mediante un procedimiento que comprende: I. Una primera etapa en la que la viabilidad de la línea celular está entre el 80 y el 100% y las células se desarrollan en medios de cultivo con una reducción consecutiva de la concentración de proteína hasta alcanzar una concentración de proteína crítica a la que la viabilidad celular disminuye hasta el 0%; y II. una segunda etapa en la que, una vez que se ha predeterminado la concentración crítica, la concentración precrítica se fija como una concentración de proteína tal a la que es posible el crecimiento celular y es el punto de partida para reducir lentamente la concentración de proteína hasta que el cultivo celular alcanza la viabilidad celular y el tiempo de duplicación de la población iniciales. The invention relates to a method of obtaining mammal cells which are adapted to grow in a medium free of serum and proteins. The inventive method includes a process consisting of two adaptation steps comprising a critical protein concentration interval for each cell line. The invention also relates to mammal cell lines which grow in a stable manner in a medium free of serum and proteins over at least 40 generations. The invention further relates to clones which express anti-CD6 T1hT and EGFhR 3 antireceptor humanised antibodies and the anti-CD 3 T 3Q chimeric antibody as well as fragments of said antibodies.