Dispositivo para la detección de nucleótidos individuales

Un dispositivo de secuenciación de ácidos nucleicos microfluido caracterizado por que comprende: * una primera zona que comprende un sitio de unión contenido en ella, al cual se une el ácido nucleico a secuenciar; una primera tubería microfluida para hacer que un primer medio de pirofosforólisis acuoso fluya sobre el sitio de unión, permitiendo de este modo que el ácido nucleico se pirofosforolice de forma progresiva en sus nucleótidos trifosfato constituyentes y una segunda tubería microfluida para eliminar un segundo medio acuoso que fluye, que contiene los nucleótidos trifosfato, de alrededor del sitio de unión; * un medio para crear microgotitas del segundo medio acuoso en un disolvente transportador inmiscible en agua, al menos algunas de las cuales contiene uno de dichos nucleótidos trifosfato, aguas abajo de la primera zona; * medios de contacto dispuestos para introducir de forma consecutiva en el segundo medio acuoso del cual se componen las microgotitas, una o más de una pirofosfatasa, una ligasa, una polimerasa, un sistema de captura marcado con fluoróforos en un estado no detectable selectivo para al menos uno de los nucleótidos trifosfato obtenidos del ácido nucleico y una exonucleasa o polimerasa que tiene actividad exonucleasa, para liberar los fluoróforos detectables de cualquier sistema de captura utilizado mediante exonucleolisis; * una serie de sitios de retención de microgotitas en los cuales cada microgotita se incuba hasta que se produce fluorescencia detectable; * una tercera tubería microfluida para entregar de forma sucesiva cada microgotita a uno de los sitios de retención; * un sistema de detección de fluorescencia que comprende una fuente de luz adaptada para impactar de forma sucesiva sobre cada sitio de retención tras la incubación, y; * un detector para la detección de la fluorescencia allí emitida. The present invention provides a microfluidic nucleic acid sequencing device characterised by comprising: €¢ a first zone for containing the nucleic acid to be sequenced and an enzyme for pyrophosphorolysing the nucleic acid progressively into its constituent nucleotide triphosphates; €¢ first and second microfluidic pathways for respectively introducing a first aqueous stream into the first chamber and removing a second ordered aqueous stream of the nucleotide triphosphates; €¢ a second zone connected to said second microfluidic pathway comprising a droplet head for creating microdroplets of the second aqueous stream in a water-i