Proceso de identificación y preparación de una transaminasa omega específica de (R)

Un proceso para la preparación de una transaminasa ω selectiva de (R), que comprende las siguientes etapas: a) proporcionar al menos una secuencia de biomolécula incógnita de al menos una transaminasa ω selectiva de (R) y al menos un banco de biomoléculas, b) cribar el banco de biomoléculas con la s...

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Hauptverfasser: SCHAETZLE, Sebastian, BORNSCHEUER, Uwe, HOEHNE, Matthias, ROBINS, Karen
Format: Patent
Sprache:spa
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Beschreibung
Zusammenfassung:Un proceso para la preparación de una transaminasa ω selectiva de (R), que comprende las siguientes etapas: a) proporcionar al menos una secuencia de biomolécula incógnita de al menos una transaminasa ω selectiva de (R) y al menos un banco de biomoléculas, b) cribar el banco de biomoléculas con la secuencia de biomolécula incógnita para identificar un grupo de primeras secuencias de biomolécula diana, en donde las primeras secuencias de biomolécula diana tienen un grado de identidad de secuencia de al menos un 20 % con la secuencia de biomolécula incógnita, que se calcula a nivel de aminoácidos, c) seleccionar en el grupo de las primeras secuencias de biomolécula diana un grupo de segundas secuencias de biomolécula diana, que no comprende, a nivel de aminoácidos, al menos uno de los siguientes motivos de secuencia de aminoácidos c1) a c3) siendo c1) en las posiciones 95 a 97 una secuencia de aminoácidos Tyr Xa1 Xa2, siendo Xa1 un aminoácido Ile, Val, Leu, Met, Phe, y siendo Xa2 un aminoácido Arg o Lys o c2) en las posiciones 97 a 99 una secuencia de aminoácidos Tyr Xaa Gln, siendo Xaa un aminoácido y en la región desde la posición 105 a 111 una secuencia de aminoácidos Arg Xaa Xa3, siendo Xa3 un aminoácido, siendo preferentemente His o c3) en la posición 38 Thr, en la posición 97 Lys y en las posiciones 107 a 109 una secuencia de aminoácidos Arg Xa4 Xa5, siendo Xa4 un aminoácido, siendo preferentemente Gly, y siendo Xa5 un aminoácido, siendo preferentemente Tyr y que comprende c4) en la posición 95 otro aminoácido distinto de Tyr, Arg, Lys, o en la posición 95 Tyr, pero en la posición 97 ni Arg ni Lys y c5) en la posición 40 ni Lys ni Arg y c6) en la región desde la posición 161 a 165 al menos una Lys para identificar un grupo de segundas secuencias de biomolécula diana y d) proporcionar una biomolécula que tiene una segunda secuencia de biomolécula diana identificada en la etapa c) y siendo, o codificando al menos parcialmente, una proteína con la actividad de una transaminasa ω selectiva de (R). The present invention relates to processes for the screening, preparation and characterization of (R)-selective É-transaminases, to transaminases obtained thereby and their uses in various transamination processes.