Method for the fluorimetric quantification of the ldh enzyme in solution (Machine-translation by Google Translate, not legally binding)

Method for the fluorimetric quantification of the ldh enzyme in solution. The invention is directed to the development of a method and creation of a kit for the quantification of the cytotoxic effect and/or cell viability before chemical agents (element, compound, mixture or drug in any of its states) and/or physical (ie illumination, temperature, turbulence, fluid dynamics, etc.) that may cause rupture of the cell membrane. The kit measures the release of the cytoplasmic enzyme lactate dehydrogenase (ldh) from dead and/or lysed cells. This enzyme catalyzes the oxidation of lactate, present in the kit, to pyruvate. During the reaction, the nad, also present in the kit, is reduced to nadh. The concentration of ldh is quantified through the fluorescence of the nadh formed. Indirect measurements of the ldh enzyme are made in the supernatant of cell cultures. The method is applicable both in inorganic media for microalgae and in commercial media for animal and insect cells. (Machine-translation by Google Translate, not legally binding) Método para la cuantificación fluorimétrica de la enzima LDH en disolución. La invención está dirigida al desarrollo de un método y creación de un kit para la cuantificación del efecto citotóxico y/o viabilidad celular ante agentes químicos (elemento, compuesto, mezcla o fármaco en cualquier de sus estados) y/o físicos (i.e. iluminación, temperatura, turbulencia, fluidodinámica, etc.) que puedan producir rotura de la membrana celular. El kit mide la liberación de la enzima citoplasmática lactato deshidrogenasa (LDH) proveniente de células muertas y/o lisadas. Esta enzima cataliza la oxidación del lactato, presente en el kit, a piruvato. Durante la reacción, el NAD+, también presente en el kit, es reducido a NADH. La concentración de LDH, se cuantifica a través de la fluorescencia del NADH formado. Las mediciones indirectas de la enzima LDH se realizan en el sobrenadante de cultivos celulares. El método es aplicable tanto en medios inorgánicos para microalgas como en medios comerciales para células animales y de insecto.