POLIMERASAS DE ADN TERMOESTABLES MODIFICADAS PARA SECUENCIACION

SE PROPORCIONAN POLIMERASAS TERMOESTABLES Y MODIFICADAS DE DNA QUE TIENEN UNA MAYOR EFICIENCIA PARA INCORPORAR NUCLEOTIDOS NO CONVENCIONALES, TALES COMO LOS MARCADOS CON COLORANTES DE LA FAMILIA DE LA FLUORESCEINA. ESTAS POLIMERASAS TERMOESTABLES MODIFICADAS DE DNA PUEDEN PREPARARSE POR PROCEDIMIENT...

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: SIGUA, CHRISTOPHER LIM, KALMAN, LISA VIVIAN, MYERS, THOMAS W, GELFAND, DAVID H, REICHERT, FRED LAWRENCE
Format: Patent
Sprache:spa
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Beschreibung
Zusammenfassung:SE PROPORCIONAN POLIMERASAS TERMOESTABLES Y MODIFICADAS DE DNA QUE TIENEN UNA MAYOR EFICIENCIA PARA INCORPORAR NUCLEOTIDOS NO CONVENCIONALES, TALES COMO LOS MARCADOS CON COLORANTES DE LA FAMILIA DE LA FLUORESCEINA. ESTAS POLIMERASAS TERMOESTABLES MODIFICADAS DE DNA PUEDEN PREPARARSE POR PROCEDIMIENTOS CORRESPONDIENTES A LA TECNOLOGIA DEL DNA RECOMBINANTE. LAS POLIMERASAS DE DNA TERMOESTABLES RECOMBINANTES PREPARADAS DE ACUERDO CON LA PRESENTE INVENCION SON VENTAJOSAS EN MUCHAS APLICACIONES DE SINTESIS DEL DNA IN VITRO, TALES COMO EL SECUENCIAMIENTO DEL DNA, LA SINTESIS DEL DNA MARCADO Y LA PRODUCCION DE PRODUCTOS DE EXTENSION DE INICIADOR MARCADOS. LOS CITADOS ENZIMAS DE POLIMERASA SON PARTICULARMENTE UTILES EN LOS PROCEDIMIENTOS DE SECUENCIAMIENTO DEL ACIDO NUCLEICO DE TERMINACION DE LA CADENA. SE PROPORCIONAN IGUALMENTE ACIDOS NUCLEICOS QUE CODIFICAN LAS POLIMERASAS RECOMBINANTES TERMOESTABLES DE DNA DE LA PRESENTE INVENCION, ASI COMO LOS VECTORES Y CELULAS HUESPEDES QUE LOS COMPRENDEN. SE PROPORCIONAN AL MISMO TIEMPO KITS QUE INCLUYEN LAS POLIMERASAS RECOMBINANTES TERMOESTABLES DEL DNA DE LA PRESENTE INVENCION. LAS POLIMERASAS Y PROCEDIMIENTO DE LA PRESENTE INVENCION PROPORCIONAN IMPORTANTES VENTAJAS, EN CUANTO A COSTE Y EFICIENCIA, PARA EL SECUENCIAMIENTO DEL DNA. Modified thermostable DNA polymerases having enhanced efficiency for incorporating unconventional nucleotides such as those labeled with fluorescein family dyes are provided. Such modified thermostable DNA polymerases can be prepared by methods of the recombinant DNA technology. Recombinant thermostable DNA polymerases prepared in accordance with the present invention are advantageous in many in vitro DNA synthesis applications, such as DNA sequencing, synthesis of labeled DNA and the production of labeled primer extension products. The said polymerase enzymes are particularly useful in chain termination nucleic acid sequencing methods. Nucleic acids encoding the recombinant thermostable DNA polymerases of the present invention, as well as vectors and host cells comprising same are also provided. Kits comprising the recombinant thermostable DNA polymerases of the present invention are provided too. The polymerases and methods of the present invention provide significant cost and efficiency advantages for DNA sequencing.