LAMINA CELULAR EPIDERMICA CULTIVADA, LAMINA CUTANEA CULTIVADA MULTICAPA Y PROCESO PARA PRODUCIR LAS MISMAS

Un proceso para producir una lámina cutánea cultivada multicapa para su uso en injertos, que comprende cultivar células epidérmicas en un soporte de cultivo celular que tiene una superficie de sustrato recubierta con un polímero sensible a temperatura cuya temperatura de solución crítica superior o inferior en agua es 0-80 °C, para obtener una lámina celular cultivada multicapa de células epidérmicas, llevar la temperatura de la solución de cultivo por encima de la temperatura de solución crítica superior o por debajo de la temperatura de solución crítica inferior, poner la lámina celular en contacto cercano con una membrana polimérica y desprender la lámina celular junto con una membrana polimérica, en el que las células epidérmicas se cultivan en presencia de células 3T3 crecidas como una capa de alimentación que forman de este modo la lámina celular cultivada multicapa de células epidérmicas, en el que la célula epidérmica es una seleccionada del grupo que consiste en queratinocitos y célula de membrana mucosa, en el que la membrana polimérica se selecciona del grupo que consiste en poliviniliden difluoruro (PVDF) , celulosa y sus derivados y en el que el desprendimiento de la lámina celular no implica tratamiento con una enzima proteolítica. Cells are cultured on a cell culture support having a substrate surface coated with a temperature-responsive polymer whose upper or lower critical solution temperature in water is 0ˆ¼80°C, optionally forming multiple cultured cell layers by a conventional technique, and subsequently: (1) the temperature of the culture solution is brought to above the upper critical solution temperature or below the lower critical solution temperature; (2) the cultured epidermal cell sheet or multi-layered skin sheet is brought into close contact with the polymer membrane; and (3) the sheet is peeled off together with the polymer membrane. The thus obtained epidermal cultured cell sheet and multi-layered cultured skin sheet do not degrade E-cadherin or laminin 5 as contrasted with Dispase treatment and they still involve very few structural defects; these sheets hence hold great promise in clinical applications such as skin grafting.