GENERACION DE ELEMENTOS DE UNION ESPECIFICA QUE SE UNEN A (POLI)PEPTIDOS CODIFICADOS POR FRAGMENTOS DE ADN GENOMICO O EST
Un procedimiento para generar un elemento de unión específica a un (poli)péptido que está codificado por una secuencia de ácido nucleico comprendida en un fragmento de ADN genómico o un marcador de secuencia expresada (EST) que comprende: a) expresar una molécula de ácido nucleico que codifica una p...
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Format: | Patent |
Sprache: | spa |
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Zusammenfassung: | Un procedimiento para generar un elemento de unión específica a un (poli)péptido que está codificado por una secuencia de ácido nucleico comprendida en un fragmento de ADN genómico o un marcador de secuencia expresada (EST) que comprende: a) expresar una molécula de ácido nucleico que codifica una proteína de fusión en una célula hospedadora en condiciones que permitan la formación de cuerpos de inclusión que comprenden dicha proteína de fusión, en el que dicha proteína de fusión comprende aa) un elemento de fusión de (poli)péptido/proteína que se deposita en cuerpos de inclusión cuando se expresa en dicha célula hospedadora en dichas condiciones y que comprende el primer dominio N-terminal de la proteína del gen III de fago filamentoso y ab) dicho (poli)péptido, en el que dicha célula hospedadora es E. coli; b) aislar dichos cuerpos de inclusión; y c) generar una inmunoglobulina o un fragmento de la misma que se une específicamente a dicho (poli)péptido seleccionando un miembro de una colección recombinante de inmunoglobulinas o fragmentos de las mismas expuesto en la superficie de un fago filamentoso que comprende el primer dominio N-terminal de la proteína del gen III, en el que la proteína del gen III se expone en la superficie de dicho fago filamentoso.
The present invention relates to the generation of specific binding partners binding to (poly)peptides encoded by genomic DNA fragments or ESTs. The (poly)peptides are expressed as part of fusion proteins which are forming inclusion bodies on expression in host cells. The inclusion bodies are used to generate binding partners which bind specifically to said (poly)peptides. The specific binding partners, in particular immunoglobulins or fragments thereof, are useful for analysis and functional characterisation of proteins encoded by nucleic acid sequences comprising the corresponding genomic DNA fragments or ESTs. The invention further relates to nucleic acid molecules, vectors and host cells to be used in the methods of the present invention. The invention further relates to the use of fusion proteins comprising the first N-terminal domain of the geneIII protein of filamentous phage as fusion partner for the expression of a (poly)peptide/protein fused to said fusion partner, and to methods for the expression of (poly)peptide/proteins. |
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