FRAGMENTOS DE ANTICUERPOS ESPECIFICOS PARA EL ANTIGENO CARCINOEMBRIONARIO (ACE) HUMANO

Fragmentos de anticuerpo tipo Fv de cadena sencilla (scFv) mono y divalente (diacuerpo), obtenidos por técnicas de ADN recombinante a partir del anticuerpo monoclonal (AcM) anti-antígeno carcinoembrionario (CEA) CB/ior-CEA.1. Este AcM tiene muy alta afinidad por el CEA y se emplea en el diagnóstico y seguimiento de tumores colorectales del hombre. Como el AcM original, los fragmentos scFv monovalente y diacuerpo exhiben altas afinidades por el CEA humano y reconocen un epítope dependiente de la conservación de carbohidratos. El fragmento scFv monovalente y diacuerpo tienen constantes de afinidad por el CEA de (5.0 ñ 0.4) x 109 L mol-1 y (2.8 ñ 0.3) x 1010 L mol-1, respectivamente. Estos dos fragmentos no presentan reactividad cruzada con células y tejidos humanos normales, excepto la mucosa colónica normal donde el CEA está ocasionalmente presente. Los fragmentos pueden producirse mediante la expresión en microorganismos recombinantes, a partir del clonaje de secuencias de ácidos nucleicoscodificantes para regiones variables obtenidas del hibridoma que produce el AcM CB/ior-CEA.1. Al igual que el AcM original, el scFv monovalente y el diacuerpo tienen la capacidad de identificar in vivo en ratones a células productoras de CEA humano que crecen formando tumores. El scFv monovalente y el diacuerpo tienen un tamaño molecular 5 y 2.5 veces inferior, respectivamente, que el AcM de ratón y no poseen dominios Fc, lo que les confiere el potencial de penetrar mejor los tejidos in vivo y de ser menos inmunogénicos en el hombre. The invention refers to mono- and divalent (diabody) single chain Fv (scFv) antibody fragments, obtained by recombinant DNA techniques from the anti-carcinoembryonic antigen (CEA) monoclonal antibody (Mab) CB/ior-CEA.1. This antibody has high affinity for CEA and is employed in the diagnosis and follow-up of human colorectal tumors. As the original Mab, the monovalent fragment and the diabody exhibit high affinity for human CEA and recognize an epitope dependent of carbohydrate conservation. The monovalent scFv fragment and the diabody have affinity constants for CEA of (5.0 +/- 0.4) x 10 L mol and (2.8 +/- 0.3) x 10 L mol, respectively. These two fragments do not show cross reactivity with human normal cells and tissues, exception made of the normal colonic mucosa, where CEA is occasionally present. The fragments can be produced through the expression in recombinant microorganisms, starting from the cloning of the encoding variable r