ENZIMAS CONDROITIN LIASA
LA PRESENTE INVENCION DESCRIBE UN METODO DE PRODUCCION DE DOS ENZIMAS ALTAMENTE PURIFICADAS, CAPACES DE DEGRADAR POLISACARIDOS DE SULFATO DE CONDROITINA. SE DESTACA UN METODO DE PURIFICACION EN MULTIPLES ETAPAS, QUE INCORPORA RUPTURA CELULAR, CROMATOGRAFIA DE INERCAMBIO CATIONICO, CROMATOGRAFIA DE A...
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Format: | Patent |
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Zusammenfassung: | LA PRESENTE INVENCION DESCRIBE UN METODO DE PRODUCCION DE DOS ENZIMAS ALTAMENTE PURIFICADAS, CAPACES DE DEGRADAR POLISACARIDOS DE SULFATO DE CONDROITINA. SE DESTACA UN METODO DE PURIFICACION EN MULTIPLES ETAPAS, QUE INCORPORA RUPTURA CELULAR, CROMATOGRAFIA DE INERCAMBIO CATIONICO, CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD, CROMATOGRAFIA DE HIDROXILAPATITO, CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO IONICO DE ALTA RESOLUCION, Y EXCLUSION POR TAMAÑOS. SE AISLARON ASI UNA PROTEINA DE 77000 -+ 5000 DALTON, CAPAZ DE DEGRADAR SULFATOS DE CONDROITINA A Y C, Y UNA PROTEINA DE 55000 + 2300 DALTON, CAPAZ DE DEGRADAR SULFATO DE DERMATAN. LOS GENES QUE CODIFICAN PARA DICHAS ENZIMAS, CONDROITINASA AC Y CONDROITINASA B, RESPECTIVAMENTE, SE HAN CLONADO Y SE DESCRIBEN METODOS PARA SU UTILIZACION.
The present invention describes a method for the production of two highly purified enzymes capable of degrading chondroitin sulfate polysaccharides. A multi-step purification method incorporating cell disruption, cation exchange chromatography, affinity chromatography, hydroxylapatite chromatography, high resolution ion exchange chromatography and size exclusion is outlined. A 77,000 ± 5,000 Dalton protein capable of degrading chondroitin sulfates A and C and a 55,000 ± 2,300 Dalton protein capable of degrading dermatan sulfate were isolated. The genes encoding these enzymes, chondroitinase AC and chondroitinase B, respectively, have been cloned and methods for their use are described. |
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