PROCEDIMIENTO DE AISLAMIENTO USANDO PROTEINAS INMOVILIZADAS CON CAPACIDADES DE UNION ESPECIFICA

SE SUMINISTRA UN METODO PARA INMOVILIZAR UNA PROTEINA DE UNION CAPAZ DE UNIRSE A UN COMPUESTO ESPECIFICO, USANDO TECNICAS RECOMBINANTES DE DNA PARA PRODUCIR LA PROTEINA DE UNION O UNA PARTE FUNCIONAL DE LA MISMA. LA PROTEINA DE UNION SE INMOVILIZA PRODUCIENDOLA COMO PARTE DE UNA PROTEINA QUIMERICA QUE TAMBIEN COMPRENDA UNA PARTE DE ANCLAJE DERIVABLE DE LA PARTE DEL TERMINAL C DE UNA PROTEINA DE ANCLAJE, ASEGURANDO DE ESTA FORMA QUE LA PROTEINA DE UNION SE LOCALICE EN EL EXTERIOR DE LA PARED CELULAR DE LA CELULA ANFITRIONA. LAS PROTEINAS DE ANCLAJE ADECUADAS SON LA {AL}-AGLUTININA DE LA LEVADURA, FLO1 (UNA PROTEINA ASOCIADA CON EL FENOTIPO DE FLOCULACION EN "S. CEREVISIAE"), LA PROTEINA DE LA PARED CELULAR MAYOR DE EUCARIOTES INFERIORES, Y UNA PROTEINASA DE UNA BACTERIA DEL ACIDO LACTICO. PARA LA SECRECION LA PROTEINA QUIMERICA PUEDE COMPRENDER UN PEPTIDO SEÑALIZADOR QUE INCLUYE AQUELLOS DEL FACTOR DE EMPAREJAMIENTO {AL} DE LA LEVADURA, LA {AL}-AGLUTININA DE LA LEVADURA, LA INVERTASA DE "SACCHAROMYCES", LA INULINASA DEL "KLUYVEROMYCES", LA {AL}AMILASA DE LOS BACILOS, Y LA PROTEINA DE LA BACTERIA DEL ACIDO LACTICO. TAMBIEN SE SUMINISTRAN POLINUCLEOTIDOS RECOMBINANTES QUE CODIFICAN DICHA PROTEINA QUIMERICA, VECTORES QUE COMPRENDEN DICHOS POLINUCLEOTIDOS, MICROORGANISMOS TRANSFORMADOS QUE TIENEN DICHA PROTEINA QUIMERICA INMOVILIZADA EN SU PARED CELULAR, Y UN PROCESO PARA LLEVAR A CABO UN PROCESO DE AISLAMIENTO UTILIZANDO DICHO ANFITRION TRANSFORMADO, EN DONDE UN MEDIO QUE CONTIENE DICHO COMPUESTO ESPECIFICO SE PONE EN CONTACTO CON DICHA CELULA ANFITRIONA PARA FORMAR UN COMPLEJO, SEPARANDO EL COMPLEJO DEL MEDIO Y, OPCIONALMENTE LIBERANDO EL COMPUESTO ESPECIFICO DE LA PROTEINA DE UNION. PCT No. PCT/EP94/00427 Sec. 371 Date Nov. 1, 1995 Sec. 102(e) Date Nov. 1, 1995 PCT Filed Feb. 10, 1994 PCT Pub. No. WO94/18330 PCT Pub. Date Aug. 18, 1994A method is provided for immobilizing a binding protein capable of binding to a specific compound, using recombinant DNA techniques for producing said binding protein or a functional part thereof. The binding protein is immobilized by producing it as part of a chimeric protein also comprising an anchoring part derivable from the C-terminal part of an anchoring protein, thereby ensuring that the binding protein is localized in or at the exterior of the cell wall of the host cell. Suitable anchoring proteins are yeast alpha -agglutinin, FLO1 (a protein associated with the flocculation phenotype in S. cerevisiae), the Major Cell W