PCR-based method for typing of Haemophilus parasuis allows discrimination of H. parasuis from other bacteria present in the pig respiratory apparatus, and classification of H. parasuis serotype

A PCR-based technique for typing of Haemophilus parasuis, is new. The technique uses primers (SEQ ID Nos. 1 and 2) that amplify a genomic region with homology to the transferring binding protein A (tbpA) genes. The technique allows discrimination relative to Actinobacillus pleuropneumoniae and Pasteurellacene strains present in the respiratory apparatus of the pig. The method permits classification 28 serotypes of H. parasuis. Se refiere un procedimiento de análisis molecular, por PCR-RFLP, que permite la detección, identificación y tipificación de Haemophilus parasuis, un microorganismo de interés en patología porcina, a partir de muestras clínicas y/o de aislamientos obtenidos en el laboratorio. El método se fundamenta en las peculiaridades de los genes tbp en esta bacteria cuando se compara con otras próximas, como Actinobacillus suis y Actinobacillus pleuropneumoniae. El procedimiento discrimina H. parasuis de A. pleuropneumoniae; de igual modo también diferencia otros miembros, no patógenos, de la familia Pasteurellaceae, presentes en el aparato respiratorio del cerdo, como A. minor, A. porcinus y A. indolicus. El producto de la amplificación por PCR, sometido a restricción con distintas nucleasas (AvaI, TaqI y RsaI) permite clasificar los serotipos de H. parasuis en un total de 28 tipos genéticos diferentes, lo que representa una alternativa de mucho interés al sistema tradicional de tipificación serológica.