METODO PARA LA AMPLIFICACION MEDIANTE TRANSCRIPCION EN REVERSO ACOPLADA A UNA REACCION DE NESTED O SEMI-NESTED PCR EN UN SOLO PASO, DE UN ARN DIANA, Y SUS APLICACIONES EN LA IDENTIFICACION DE ENTEROVIRUS Y EN LA DISCRIMINACION ENTRE POLIOVIRUS Y ENTEROVIRUS NO-POLIO

Método para la amplificación mediante transcripción en reverso acoplada a una reacción de nested o semi-nested PCR en un solo paso, de un ARN diana, y sus aplicaciones en la identificación de enterovirus y en la discriminación entre poliovirus y enterovirus no-polio. El método comprende efectuar la transcripción en reverso de un ARN diana contenido en una muestra mediante el empleo de una enzima con actividad apropiada y aplicar un tratamiento térmico para desnaturalizar el ARN diana y un ciclo térmico de baja temperatura. A partir del ADNc obtenido se puede amplificar un fragmento por nested o semi-nested PCR. El método tiene utilidad en la amplificación de ARN y en la detección e identificación de entidades macromoleculares que comprenden ARN, por ejemplo, en la identificación de enterovirus y en la discriminación de poliovirus y enterovirus no-polio. Method for the amplification by reverse transcription coupled to a nested or semi-nested reaction PCR in a single step, of a target RNA, and its applications in the identification of enterovirus and the discrimination between poliovirus and non-polio enterovirus. The method consists in performing the reverse transcription of a target RNA contained in a sample by employing an enzyme with the appropriate activity and applying a heat treatment for denaturalising the target RNA and a low temperature heat cycle. From the DNAc obtained, a fragment can be amplified using nested or semi-nested PCR. The method is useful in the amplification of RNA and in the detection and identification of macromolecular entities that include RNA, for example, in the identification of enterovirus and in the discrimination of poliovirus and non-polio enterovirus.