Recombinant DNA comprising the green fluorescent protein gene, useful e.g. to determine colonization capacity of bacteria, includes the mal operon of Streptococcus pneumoniae (Machine-translation by Google Translate, not legally binding)

Recombinant DNA (I) comprising the sequence of the gfp gene (encoding green fluorescent protein, GFP) and the mal regulon of Streptococcus pneumoniae, is new. Independent claims are also included for the following: (1) expression vectors containing (I) and elements required for constitutive or inducible expression (2) transformed cells containing either the vector of (a) or (I) integrated into a bacterial chromosome and (3) methods for detecting cells of (b). (Machine-translation by Google Translate, not legally binding) Mejoras introducidas en la patente principal n° 9901813 por Procedimiento de obtención y detección de bacterias gram- positivas fluorescentes. Esta invención presenta un nuevo método para detectar Streptococcus pneumoniae mediante fluorescencia utilizando la proteína fluorescente verde (GFP) expresada de forma constitutiva. Esta mejora incluye la construcción del plásmido pFL16GFP y utilización de dicho plásmido para sobreproducir de forma constitutiva la proteína fluorescente verde (GFP). Este método incluye la construcción del plásmido pFL16GFP que contiene, clonado en el vector pLS16 (portador del replicón de pMV158) el gen indicador gfp bajo el control transcripcional del promotor constitutivo del gen tetL de Streptococcus agalactiae. Este método incluye la detección directa por técnicas de fluorescencia de los niveles de la proteína GFP en células portadoras del plásmido, en medio de cultivo conteniendo distintas fuentes de carbono y a distintos pHs.