PROCESO DE TRANSFORMACION DE PLANTAS CON IDENTIFICACION TEMPRANA DE SUCESOS DE TRANSFORMACION DE LA LINEA GERMINAL

SE DESCRIBE UN METODO PARA HACER MAS EFICIENTE LA TRANSFORMACION GENETICA LINEA DEL GERMEN EN PARTICULA-MEDIADA DE ESPECIES DE HABAS COMO LAS DE SOJA. DESPUES DE UN SUCESO DE TRANSFORMACION PARTICULA-MEDIADA, EN AUSENCIA DE UN GENE MARCADOR SELECCIONABLE, UN GRAN NUMERO DE PLANTAS DEBEN SER REGENERA...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: MCCABE, DENNIS E, CHRISTOU, PAUL
Format: Patent
Sprache:spa
Schlagworte:
Online-Zugang:Volltext bestellen
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Beschreibung
Zusammenfassung:SE DESCRIBE UN METODO PARA HACER MAS EFICIENTE LA TRANSFORMACION GENETICA LINEA DEL GERMEN EN PARTICULA-MEDIADA DE ESPECIES DE HABAS COMO LAS DE SOJA. DESPUES DE UN SUCESO DE TRANSFORMACION PARTICULA-MEDIADA, EN AUSENCIA DE UN GENE MARCADOR SELECCIONABLE, UN GRAN NUMERO DE PLANTAS DEBEN SER REGENERADAS PARA ENCONTRAR LOS SUCESOS DE TRANSFORMACION EN LINEA DEL GERMEN SIMILAR QUE HAN TENIDO LUGAR. SE HA DESCUBIERTO QUE UTILIZANDO EL PROCESO DE TRANSFORMACION, UN GENE MARCADOR LIGADO AL GENE DE INTERES, Y ESCINDIENDO UN SEGMENTO DEL TALLO DURANTE EL PROCESO DE REGENERACION, Y COMPONIENDO LA SECUENCIA DEL GENE MARCADOR, CIERTAS PAUTAS O FENOLITOS PUEDEN SER IDENTIFICADAS EN EL SEGMENTO DEL TALLO, QUE ESTAN ASOCIADAS CON UN INCREMENTO DE LA FRECUENCIA DE LOS SUCESOS DE TRANSFORMACION DEL GERMEN. A MEDIDA QUE LAS PLANTAS SON REGENERADAS, OTROS INDICIOS DE EXPRESION DEL GENE, EN EL PRIMER ESTADO DE TRIFOLIACION DE LA HOJA Y AL TERCER O CUARTO ESTADO DE TRIFOLIACION DE LA HOJA SIRVEN TAMBIEN COMO MARCADORES DE LA TRANSFORMACION EN LINEA DEL GERMEN. UTILIZANDO ESTOS MARCADORES EN LOS ESTADOS INICIALES DE LA REGENERACION DE LA PLANTA PARA ESTIMAR LOS SUCESOS DE LINEA DEL GERMEN, ES POSIBLE CONCENTRAR LOS ESFUERZOS DE REGENERACION EN PLANTAS MAS PROPICIAS A SUMINISTRAR LOS SUCESOS DE LINEA DEL GERMEN Y DESECHAR LOS OTROS, DISMINUYENDO EL ESFUERZO PARA CONSEGUIR EL DESEADO NUMERO DE SUCESOS DE TRANSFORMACION. A method is disclosed for making more efficient the particle-mediated germ line genetic transformation of bean species such as soybean. After a particle-mediated transformation event, in the absence of a selectable marker gene, relatively large numbers of plants must be regenerated to find the relatively low likelihood germ line transformation events which have occurred. It has been discovered that using in the transformation process a marker gene linked to the gene of interest, and by excising a segment of the stem of the shoot during the regeneration process and assaying the sequent for the marker gene, certain patterns or phenotypes can be identified in the stem segment which are associated with an increased frequency of germ line transformation events. As the plants are regenerated, other indices of gene expression, at the first trifoliate leaf stage and at the third or fourth trifoliate leaf stage, also serve as markers of the likelihood of germ line transformation. By using these markers in the relatively early stages of plant regeneration to assay for like