ASIALOGLICOPROTEINAS DEL VIRUS DE LA HEPATITIS C
Una asialoglicoproteína del virus de la hepatitis C (HCV) seleccionada entre una asialigricoproteína expresada en la región E1 del HCV y una asialoglicoproteína expresada en la región E2 del HCV, y agregados de las mismas, pudiéndose obtener dicha asialoglicoproteína mediante el método que comprende...
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Format: | Patent |
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Zusammenfassung: | Una asialoglicoproteína del virus de la hepatitis C (HCV) seleccionada entre una asialigricoproteína expresada en la región E1 del HCV y una asialoglicoproteína expresada en la región E2 del HCV, y agregados de las mismas, pudiéndose obtener dicha asialoglicoproteína mediante el método que comprende las etapas de:
(i) cultivar una célula hospedante de mamífero tranformada con un gen estructural que codifica una asialoglicoproteína de HCV expresada en la región E1 de HCV, de la región E2 de HCV o de ambas, en un medio de cultivo adecuado, estando dicho gen estructural unido a una secuencia que codifica un conductor de la secreción que dirige a la asialoglicoproteína hacia el retículo endoplásmico;
(ii) provocar la expresión de dicho gen estructural y conductor de la secreción, bajo condiciones que inhiben la sialilación; en el que dichas condiciones que inhiben la sialilación comprenden inhibir el transporte de las glicoproteínas desde el retículo endoplásmico hacia el aparato de Golgi de las células; y
(iii) aislar dicha asialoglicoproteína de HCV del cultivo celular peoniendo en contacto dicha asialoglicoproteína de HCV con una proteína de unión a manosa, específica para glicoproteínas terminadas en manosa, en la que menos de aproximadamente 10% de los carbohidratos N-unidos totales son ácido siálico.
Two Hepatitis C Virus envelope proteins (E1 and E2) are expressed without sialylation. Recombinant expression of these proteins in lower eukaryotes, or in mammalian cells in which terminal glycosylation is blocked, results in recombinant proteins which are more similar to native HCV glycoproteins. When isolated by GNA lectin affinity, the E1 and E2 proteins aggregate into virus-like particles. Cells bearing a mannose receptor or asialoglycoprotein receptor are capable of being infected with HCV, and supporting culturing of the virus. |
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