APLICACIONES BIOQUIMICAS E INMUNOLOGICAS DE UNA PROTEINA DE FUSION GLUTATION TRANSFERASA-HISTIDINA DESCARBOXILASA DE RATA

Aplicaciones bioquímicas e inmunológicas de una proteína de fusión glutation transferasa-histidina descarboxilasa de rata. Mediante transcripción inversa (RT) y amplificación en cadena (PCR) se obtuvo un cDNA de histidina descarboxilasa derata residuos del 1 al 512 (rHDC1/512), que fue utilizado para la construcción de un plásmido recombinante capaz de expresar una fusión de la glutation transferasa (GST) con la rHDC1/512. La purificación de polipéptidos con actividad HDC se ve considerablemente simplificada y abaratada con la utilización de esta fusión (GST-rHDC1/512), en comparación con la obtención de proteína HDC de fuentes naturales. La proteína de fusión se puede utilizar para la búsqueda y caracterización de fármacos antihistamínicos que tengan como diana la actividad histidina descarboxilasa, y para estudios de afinidad, degradación y modificaciones post-traduccionales del polipéptido HDC. A partir de la proteína de fusión GST-rHDC1/512 se obtuvieron anticuerpos policlonales, capaces de reconocer al antigeno original HDC de rata, con interés en el desarrollo de métodos de purificación y diagnóstico de la proteína.