Process for obtaining amplified fragments of nucleic acid from viral and subviral particles which contain RNA

Process for obtaining amplified fragments of nucleic acid from viral and subviral particles which contain RNA. The process comprises capturing the viral or subviral particles in a thermocycler tube, adding to the tube the necessary reagents to perform reverse transcription (RT) and enzyme amplificat...

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Hauptverfasser: BLANCO URGOITI BEGONA, TORRES PASCUAL VICENTE, PONZ ASCASO FERNANDO
Format: Patent
Sprache:eng ; spa
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Beschreibung
Zusammenfassung:Process for obtaining amplified fragments of nucleic acid from viral and subviral particles which contain RNA. The process comprises capturing the viral or subviral particles in a thermocycler tube, adding to the tube the necessary reagents to perform reverse transcription (RT) and enzyme amplification through the polymerase chain reaction (PCR), placing the tube in a thermocycler and applying the appropriate heat cycle to first perform RT and then PCR without the need to add reagents between the two reactions or to manipulate the sample tubes, in which the PCR uses a heat-stable DNA polymerase. The amplified fragments can be subjected to various analyses to detect, identify and type the viral or subviral particles. This process has application in diagnosis and molecular epidemiology studies. PROCEDIMIENTO PARA LA OBTENCION DE FRAGMENTOS AMPLIFICADOS DE ACIDO NUCLEICO DE PARTICULAS VIRALES Y SUBVIRALES QUE CONTIENEN RNA. EL PROCEDIMIENTO COMPRENDE CAPTURAR SOBRE UN TUBO DE UN TERMOCICLADOR LAS PARTICULAS VIRALES O SUBVIRALES, AÑADIR AL TUBO LOS REACTIVOS NECESARIOS PARA EFECTUAR LA TRANSCRIPCION INVERSA (TR) Y LA AMPLIFICACION ENZIMATICA POR REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR), INTRODUCIR EL TUBO EN EL TERMOCICLADOR Y APLICAR UN CICLO TERMICO ADECUADO PARA EFECTUAR PRIMERO LA TR Y POSTERIORMENTE LA PCR SIN NECESIDAD DE AÑADIR REACTIVOS ENTRE AMBAS REACCIONES NI MANIPULAR LOS TUBOS CON MUESTRAS, PARA LO CUAL, EN LA PCR SE UTILIZA UNA DNA POLIMERASA TERMOESTABLE. LOS FRAGMENTOS AMPLIFICADOS PUEDEN SER SOMETIDOS A DIVERSOS ANALISIS PARA DETECTAR, IDENTIFICAR Y TIPIFICAR LA PARTICULA VIRAL O SUBVIRAL. ESTE PROCEDIMIENTO TIENE APLICACION EN DIAGNOSTICO Y ESTUDIOS DE EPIDEMIOLOGIA MOLECULAR.