METODO DE ENRIQUECIMIENTO PARA VARIANTES DE PROTEINAS CON PROPIEDADES DE UNION ALTERADAS

SE DESCRIBE UN METODO PARA SELECCIONAR NUEVAS PROTEINAS TALES COMO LA HORMONA DEL CRECIMIENTO Y VARIANTES DE FRAGMENTOS DE ANTICUERPOS QUE TIENEN PROPIEDADES DE ENLACE ALTERADAS PARA SU RESPECTIVAS MOLECULAS RECEPTORAS. EL METODO COMPRENDE LA FUSION DE UN GEN PORTADOR DE UNA PROTEINA DE INTERES PARA...

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: BASS, STEVEN, GREENE, ROLAND, WELLS, JAMES, A, HENNER, DENNIS, J, LOWMAN, HENRY, B, GARRARD, LISA, J
Format: Patent
Sprache:spa
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Beschreibung
Zusammenfassung:SE DESCRIBE UN METODO PARA SELECCIONAR NUEVAS PROTEINAS TALES COMO LA HORMONA DEL CRECIMIENTO Y VARIANTES DE FRAGMENTOS DE ANTICUERPOS QUE TIENEN PROPIEDADES DE ENLACE ALTERADAS PARA SU RESPECTIVAS MOLECULAS RECEPTORAS. EL METODO COMPRENDE LA FUSION DE UN GEN PORTADOR DE UNA PROTEINA DE INTERES PARA EL TERMINAL CARBOXI DOMINANTE DEL GEN III QUE PROTEGE LA PROTEINA DEL PHAGE FILAMENTOSO M13. SE MUTA LA FUSION DEL GEN PARA FORMAR UNA COLECCION DE PROTEINAS DE FUSION EXPUESTAS ESTRUCTURALMENTE QUE SE EXPRESAN EN BAJA CANTIDAD SOBRE LA SUPERFICIE DE UNA PARTICULA PHAGENIDA. LA SELECCION Y CRIBA BIOLOGICA SE EMPLEA PARA IDENTIFICAR NUEVOS LIGANTES, UTILES COMO CANDIDATOS MEDICAMENTOS. SE DESTACAN ESPECIALMENTE LOS VECTORES DE EXPRESION PHAGEMIDA Y VARIANTES ELEGIDOS DE LAS HORMONAS HUMANAS DE CRECIMIENTO. A method for selecting novel proteins such as growth hormone and antibody fragment variants having altered binding properties for their respective receptor molecules is provided. The method comprises fusing a gene encoding a protein of interest to the carboxy terminal domain of the gene III coat protein of the filamentous phage M13. The gene fusion is mutated to form a library of structurally related fusion proteins that are expressed in low quantity on the surface of a phagemid particle. Biological selection and screening are employed to identify novel ligands useful as drug candidates. Disclosed are preferred phagemid expression vectors and selected human growth hormone variants.