CASTASTERONE HORSERADISH PEROXIDASE CONJUGATE AS LABELED ANTIGEN IN ENZYME IMMUNOASSAY OF (24S)-METHYLBRASSINOSTEROIDS

The invention relates to immune-enzyme analysis of brassinosteroid phytohormones, namely to a conjugate of castasterone with horseradish peroxidase (HRP) which may be used as labeled antigen. The task of the present invention is castasterone-horseradish peroxidase conjugate which may be used as labeled antigen in enzyme immunoassay of (24S)-methylbrassinosteroids - castasterone and brassinolide. The problem is solved by a castasterone-horseradish peroxidase conjugate which was prepared by reaction of 6-O-carboxymethyloxime of castasterone with HRP solution in bicarbonate buffer (pH 8.35) followed by chromatographic purification of product on Sephadex G-25 and freezing in glycerin. Изобретение относится к области иммунохимического анализа фитогормонов брассиностероидов, а именно к конъюгату кастастерона с пероксидазой хрена в качестве меченого антигена. Задачей настоящего изобретения является конъюгат кастастерона и пероксидазы хрена, который может быть использован в качестве меченого антигена в иммуноферментном определении 24S-метилбрассиностероидов - кастастерона и брассинолида. Поставленная цель достигается заявляемым конъюгатом кастастерона и пероксидазы хрена, который получают взаимодействием 6-O-карбоксиметилоксима кастастерона через N-оксисукцинимидный эфир с пероксидазой хрена в водной среде в присутствии гидрокарбоната калия (рН ~8,35), очисткой на сефадексе и замораживанием раствора в глицерине.