Quantifying activity of antiviral agents, useful for drug discovery, by expression of marker genes in cells transduced with attenuated viral vector
Quantifying activity of antiviral agents (I), is new. Quantifying activity of antiviral agents comprising: (a) transducing cells with replication incompetent or attenuated viral vectors (V) which contain all functions required for infection and a gene expressing a marker (M) in infected cells; (b) a...
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Format: | Patent |
Sprache: | eng ; ger |
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Zusammenfassung: | Quantifying activity of antiviral agents (I), is new. Quantifying activity of antiviral agents comprising: (a) transducing cells with replication incompetent or attenuated viral vectors (V) which contain all functions required for infection and a gene expressing a marker (M) in infected cells; (b) adding a known amount of test compound to the cells; and (c) analyzing the activity of M with a reduction in activity relative to untreated cells or cells treated with a known antiviral determined. Independent claims are also included for preparing (V) and (I) identified by the new method.
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Quantifizierung der antiviralen Wirkung antiviraler Wirkstoffe mit den folgenden Verfahrensstufen: a) mit einem replikationsinkompetenten oder attenuierten viralen Vektor, enthaltend alle erforderlichen genetischen Informationen zur Infektion einer Zelle mit einem Zielvirustypus, wobei der virale Vektor zusätzlich genetische Information zur Expression einer Markersubstanz in der infizierten Zelle enthält und wobei zusätzlich zu einem viralen Gen zumindest eine weitere virale Sequenz derart verändert ist, daß in einer transduzierten Zelle keine Virusbestandteile oder keine potentiell pathogenen Viren gebildet werden können, werden Zellen transduziert, b) vor, während und/oder nach der Transduktion und/oder ggf. vor, während und/oder nach Induktion der Vektor-DNA-Transkription wird ein prospektiver antiviraler Wirkstoff in einer definierten Dosis zu den Zellen gegeben, c) die Aktivität an exprimierter Markersubstanz wird quantitativ analysiert und eine Reduktion, bezogen auf eine Aktivität an exprimierter Markersubstanz bei einer Transduktion und/oder Induktion ohne Zugabe antiviraler Wirkstoffe, bestimmt. |
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