Verfahren zur quantitativen Bestimmung der Konzentration von Fluorophoren einer Substanz in einer Probe und Vorrichtung zu seiner Durchführung

Die Erfindung betrifft ein Verfahren und eine Vorrichtung zur quantitativen Bestimmung der Konzentration von Fluorophoren mindestens einer Substanz in einer Probe. Von einem optischen Element (REM) wird ein konstanter Anteil des von einer Referenzlichtquelle (28) ausgesandten Referenzlichts einer Referenzlichtwellenlänge (lambdar) in Richtung eines Empfangselements (38) eingekoppelt. Es wird ein erster Messwert ermittelt, der dem Teil des eingekoppelten Referenzlichts, der auf das Empfangselement (38) trifft, entspricht. Die Probe wird mit dem von einer Anregungslichtquelle (26) ausgesandten Anregungslicht einer Anregungswellenlänge (lambdaex) bestrahlt. Es wird ein zweiter Messwert erfasst, der dem Teil des von der Probe abgestrahlten Fluoreszenzlichtes einer Emissionswellenlänge (lambdaem), der auf das Empfangselement (38) auftrifft, entspricht. Es wird das Verhältnis (Emes2/Es2) des zweiten Messwerts (Emes2) und des ersten Messwerts (Es2) ermittelt. Die Anzahl der Fluorophore in der Substanz der Probe in einem Erfassungsbereich wird unter Berücksichtigung des ermittelten Verhältnisses (Emes2/Es2) ermittelt. The invention concerns methods and apparatuses for quantitatively determining the concentration of fluorophores of a substance in a sample. A constant portion of the reference light of a reference light wave length (λr) emitted by a reference light source is coupled in by an optical element in the direction of a receiving element. A first value corresponding to the portion of the reference light coupled in which is incident on the receiving element is detected. The sample is irradiated with the excitation light of an excitation wave length (λex) emitted by an excitation light source. A second value corresponding to the portion of the fluorescent light of an emission wave length (λem) emitted by the sample which is incident on the receiving element. The ratio of the second value to the first value is determined. The number of fluorophores in the substance is determined based on the ratio.