Method of culturing human mezenchymal stem cells, particularly for facilitating fracture healing process, and bioreactor for carrying out the method

Podstata rešení spocívá ve zpusobu pestování mezenchymových kmenových bunek, ve kterém po aseptickém oddelení mononukleárních bunek z drenové krve jsou tyto nasazeny v nízké hustote do sterilních plastových kultivacních nádobek a pestovány po dobu cca jednoho až trí týdnu v médiu CellGro.sup.TM.n. hematopoietic stem cell, schváleném pro klinické použití s prídavkem 10% lidského séra a suplementu, pricemž v prubehu kultivace jsou alespon jednou pridány suplementy, aniž je treba odmývat neadherentní hemopoetické bunky, aniž je treba menit živný roztok a aniž je jakkoli treba zasahovat do uzavreného kultivacního systému za bežných podmínek pro pestování tkánových kultur. Pro pestování mezenchymových kmenových bunek v uzavreném kultivacním systému ke klinickému použití v oblasti rekonstrukcní ortopedie je navržen jednoduchý bioreaktor, sestávající z kazetove razených kultivacních nádobek s filtry pro zabezpecení sterilní výmeny vzduchu a s aseptickými vstupy pro nasazování a sklizení bunek a pro doplnování suplementu, spocívajících volne ve vhodném nosici. The present invention relates to a novel method of cultivation of mesenchymal stem cells, wherein after aseptic separation of mononuclear cells from the marrow blood, said cells are seeded in low density into sterile plastic cultivation vessels and cultivated for approximately one to three weeks in CellGroeTM Hematopoietic Stem Cell Medium, certified for the clinical use, with an addition of 10 percent of human serum and supplements, wherein the supplements are added at least once in the course of the cultivation, without removal of hematopoietic cells and without medium exchange during the cultivation procedure, without any interference in the closed cultivation system, under the standard conditions for the cultivation of tissue cultures. For the cultivation of the mesenchymal stem cells in the closed cultivation system for the clinical use in the field of orthopedic surgery, a simple bioreactor is proposed. The bioreactor consists of a cassette system containing cultivation vessels with filters for securing the sterile exchange of gas and with aseptic inlets for seeding and harvesting the cells and adding the supplements resting freely on a suitable carrier.