PROCESO PARA LA TIPIFICACIÓN RÁPIDA DE MICROORGANISMOS Y JUEGO DE REACTIVOS EMPLEADO

Se provee un proceso para tipificar rápidamente levaduras, parásitos y bacterias. Comprende los siguientes pasos: a) Preparar, en 5 a 60 minutos, ADN intacto e inmovilizado mediante un método que emplea un juego de reactivos que solo contiene solución tampón, un detergente, un agente quelante y un agente que rompe los puentes de hidrógeno. b) Separar moléculas de ADN intactas o sus fragmentos de restricción usando miniequipos de electrofóresis de campos pulsantes de los sistemas CHEF (Contour Clamped Homogeneous Electric Field) y TAFE (Transversal Alternating Field Electrophoresis) en tiempos comprendidos entre 2.5 y 7 horas. c) Seleccionar las condiciones óptimas que se aplicarán en el miniCHEF empleando un método que simula a priori los patrones electroforéticos que se obtendrían en dichos geles. d) Brindar los tiempos de reorientación, velocidades de migración y tallas de las moléculas sin emplear marcadores de tallas pero valiéndose de un método que analiza distancias migradas. A process for rapid typing of yeast, parasites and bacteria is provided. It comprises the following steps: a) Preparing immobilized intact DNA in 5 to 60 minutes aided by a method involving a reagent kit that only contains buffer solution, a detergent, a metal chelating agent and an agent to disrupt the hydrogen bonds. b) Separating intact DNA molecules or their restriction fragments in miniequipments for Pulsed Field Gel Electrophoresis of the CHEF (Contour Clamped Homogeneous Electric Field) and TAFE (Transversal Alternating Field Electrophoresis) systems in times comprised between 2.5 and 7 hours. c) Selecting the optimal conditions that should be set in miniCHEF with the aid of a method to simulate the electrophoresis patterns d) Providing reorientation times, migration velocities and sizes of the molecules calculated with the aid of a method to analyze the migrated distances without the use of size markers.