METHODS OF PRODUCING AND USING HUMAN HEPATOCYTES AND RELATED COMPOSITIONS

Provided are isolated expanded human hepatocytes and methods of producing isolated expanded human hepatocytes. In certain embodiments, the methods comprise introducing human hepatocytes into the liver of a non-human in vivo bioreactor, expanding the human hepatocytes in the liver of the non-human in vivo bioreactor, and collecting hepatocytes from the liver of the non-human in vivo bioreactor. The collected hepatocytes comprise a xenomixture of expanded human hepatocytes and non-human in vivo bioreactor cells, including hepatocytes endogenous to the in vivo bioreactor. Such methods may further comprise subjecting the xenomixture to centrifugal elutriation under conditions sufficient to produce an elutriation fraction enriched for the expanded human hepatocytes, and/or removing non-human in vivo bioreactor cells from the elutriation fraction via a negative selection process. Also provided are isolated expanded human hepatocytes produced according to such methods. Centrifugal elutriation- and negative selection-based methods of enriching for human hepatocytes in a xenomixture, and certain compositions useful in such methods, are also provided. L'invention concerne des hépatocytes humains mis en croissance isolés et des procédés de production d'hépatocytes humains mis en croissance isolés. Dans certains modes de réalisation, les procédés consistent à introduire des hépatocytes humains dans le foie d'un bioréacteur non humain in vivo, à mettre en croissance les hépatocytes humains dans le foie du bioréacteur non humain in vivo, et à collecter les hépatocytes du foie du bioréacteur non humain in vivo. Les hépatocytes collectés comprennent un xénomélange d'hépatocytes humains mis en croissance et de cellules de bioréacteur non humain in vivo, y compris d'hépatocytes endogènes au bioréacteur in vivo. De tels procédés peuvent en outre consister à soumettre le xénomélange à une élutriation centrifuge dans des conditions suffisantes pour produire une fraction d'élutriation enrichie en hépatocytes humains mis en croissance, et/ou à éliminer les cellules de bioréacteur non humain in vivo présentes dans la fraction d'élutriation par l'intermédiaire d'un processus de sélection négative. L'invention concerne également des hépatocytes humains mis en croissance isolés produits conformément à de tels procédés. L'invention concerne également des procédés d'enrichissement en hépatocytes humains à base d'élutriation centrifuge et de sélection négative dans un xénomélange, et c