HUMAN HEPATOCYTE CULTURE MEDIUM AND CONDITIONED MEDIUM OF IN VITRO CULTURED HUMAN HEPATOCYTES AND USES THEREOF

HH culture media and methods are provided to allow for recovery from injury or stress associated with cell isolation procedures and freeze/thaw cycle(s) by the use of a DMSO-supplemented medium, i.e., Phase 1 (recovery-phase). Moreover, HH culture media and methods are provided to allow for support of hepatic functionality of cultured HH at a comparable level to that of the human liver by the use of a DMSO, DMSO2, or TMSO-supplemented medium, i.e., Phase 2 (maintenance-application phase). These HH are suitable for the in vitro study of liver biology, diseases drug metabolism and pharmacokinetics. Furthermore, the culture supernatant of HH during Phase 2, namely, conditioned culture medium of human hepatocytes (CMHH), is provided, which facilitates iHeps maturation and supports the cell fate maintenance of hepatocytes. Methods of preparing CMHH are also provided, including culturing humanized liver chimeric animal derived-human hepatocytes and/or primary human hepatocytes in a medium to be collected. L'invention concerne des milieux de culture d'hépatocytes humains (HH) et des procédés pour permettre une récupération d'une lésion ou d'un stress associé à des procédures d'isolation cellulaire et à un ou plusieurs cycles de congélation/décongélation à l'aide d'un milieu enrichi en DMSO, c'est-à-dire la phase 1 (phase de récupération). De plus, des milieux de culture de HH et des procédés sont prévus pour permettre le support de la fonctionnalité hépatique de HH cultivés à un niveau comparable à celui du foie humain par l'utilisation d'un milieu supplémenté en DMSO, DMSO2, ou TMSO, c'est-à-dire la phase 2 (phase de maintien-application). Ces HH sont appropriés pour l'étude in vitro de la biologie hépatique, des maladies du métabolisme des médicaments et de la pharmacocinétique. En outre, l'invention concerne le surnageant de culture de HH pendant la phase 2, à savoir, un milieu de culture conditionné d'hépatocytes humains (CMHH), qui facilite la maturation d'iHeps et favorise le maintien du destin cellulaire des hépatocytes. L'invention concerne également des procédés de préparation de CMHH, comprenant la culture d'hépatocytes chimériques dérivés d'animaux humanisés-humains et/ou d'hépatocytes humains primaires dans un milieu à collecter.