METHODS FOR ANALYZING CHAIN MISPAIRING IN MULTISPECIFIC BINDING PROTEINS

Provided herein are methods for monitoring production of a multispecific binding protein and one or more mispaired species by a cell line, as well as methods of production and screening related thereto. In some embodiments, the methods comprise detecting an amount (e.g., a relative amount) of a multispecific binding protein and one or more mispaired species in a cell culture medium by size-exclusion ultra-performance liquid chromatography and mass spectrometry (SE-UPLC-MS). In some embodiments, the multispecific binding protein is a multispecific antibody, antibody fragment, or Fc fusion protein. L'invention concerne des procédés destinés à surveiller la production d'une protéine de liaison multispécifique et d'une ou plusieurs espèces mésappariées par une lignée cellulaire, ainsi que des procédés de production et de criblage associés. Dans certains modes de réalisation, les procédés consistent à détecter une quantité (p.ex.., une quantité relative) d'une protéine de liaison multispécifique et d'une ou plusieurs espèces mésappariées dans un milieu de culture cellulaire par une chromatographie en phase liquide ultraperformance à exclusion de taille et spectrométrie de masse (SE-UPLC-MS). Dans certains modes de réalisation, la protéine de liaison multispécifique est un anticorps, un fragment d'anticorps ou une protéine de fusion de Fc multispécifique.