POLYPEPTIDES HAVING PULLULANASE ACTIVITY SUITABLE FOR USE IN LIQUEFACTION

The present invention relates to a variant pullulanase, having increased thermo-stability and/or increased thermo-activity compared to a parent pullulanase, comprising a substitution at least a one position selected from a position corresponding to positions 432, 486, 370, 17, 77, 103, 106, 107, 190, 196, 197, 262, 279, 283, 321, 367, 375, 382, 399, 401, 402, 411, 412, 434, 435, 443, 446, 459, 460, 479, 490, 498, 514, 529, 531, 533, 541, 545, 581, 583, 595, 649, 665, 688, 700, 709, 804, 811 of SEQ ID NO: 1, and optionally a deletion of one or more, e.g., all amino acids at positions 821, 822, 823, 824, 825, 826, 827, and 828, wherein the variant has pullulanase activity, and wherein the variant has at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, or at least 99%, but less than 100% sequence identity to a parent alpha amylase selected from the group consisting of SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5. Further aspect the present invention relates to a process for liquefying starch-containing material at a temperature above the initial gelatinization temperature using an alpha-amylase and a thermo-stable pullulanase of the invention. La présente invention concerne une variante de pullulanase, présentant une stabilité thermique accrue et/ou une thermo-activité accrue par rapport à une pullulanase parente, comprenant une substitution d'au moins une position choisie parmi une position correspondant à des positions 432 486 370, 17,77 103, 106 107 190, 196 197 262, 279 283 321, 367 375 382, 399 401 402, 411 412 434, 435 443 446, 459 460 479, 490 498 514, 529 531 533, 541 545 581, 583 595 649, 665 688 700, 709, 804, 811 de SEQ ID NO : 1, et éventuellement une délétion d'un ou plusieurs, par exemple, tous les acides aminés aux positions 821 822 823, 824 825 826, 827 et 828, la variante présentant une activité de pullulanase, et la variante ayant au moins 70 %, au moins 75 %, au moins 80 %, au moins 85 %, au moins 90 %, au moins 95 %, au moins 96 %, au moins 97 %, au moins 98 %, ou au moins 99 %, mais moins de 100 % d'identité de séquence par rapport à une alpha-amylase parente choisie dans le groupe constitué par SEQ ID NO : 1, SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO :5. Un autre aspect de la présente invention concerne un procédé de liquéfaction d'une matière contenant de l'amidon à une température au-dessus de la température de gélatinisation initiale à l'aide d'une alpha