METHOD FOR DETECTING POLYMERASE INCORPORATION OF NUCLEOTIDES

Provided is a method, including hybridizing test primers to immobilized primers, wherein the immobilized primers include a predetermined sequence of nucleotides and are attached to a substrate through their 5-prime ends, individual test primers are complementary to a portion of each of at least some of the immobilized primers, and no more than one test primer molecule hybridizes to an immobilized primer molecule, extending, by only one nucleotide, at least some of the test primers with a polymerase according to templates, wherein said templates comprise immobilized primers hybridized to said test primers and nucleotides incorporated into extended test primers comprise a fluorescent tag, and detecting an amount of fluorescent test primers. L'invention concerne un procédé, comprenant l'hybridation d'amorces test à des amorces immobilisées, les amorces immobilisées comprenant une séquence prédéterminée de nucléotides et étant fixées à un substrat par leurs extrémités 5', des amorces test individuelles étant complémentaires à une partie de chacune d'au moins certaines des amorces immobilisées, et pas plus d'une molécule d'amorce test s'hybridant à une molécule d'amorce immobilisée, étendant, par un seul nucléotide, au moins une partie des amorces test avec une polymérase selon des matrices, lesdites matrices comprenant des amorces immobilisées hybridées auxdites amorces et nucléotides test incorporés dans des amorces test étendues comprenant un marqueur fluorescent, et la détection d'une quantité d'amorces test fluorescentes.