METHOD FOR PRODUCING OF HYALURONIDASE CONJUGATE WITH POLYETHYLENE PIPERAZINE DERIVATIVES AND APPLICATION OF OBTAINED CONJUGATE

This invention relates to a method for obtaining immobilized enzyme preparations, in particular to preparation and application of a novel active conjugate of an enzyme with a polymer carrier. The conjugate possesses the properties of Longidaza® drug and inhibits hyperplasia of connective tissue, and anti-inflammatory action, as well as it can be used for manufacturing stable, active and safe in use long-acting drugs in the form of a suppository, ointment, injection or cosmetic cream, and for making veterinary drugs. This method results in conjugation of hyaluronidase with a water-soluble copolymer using carbodiimide or azide method. The conjugation is carried out with the use of copolymer N-oxide 1,4-ethylene piperazine, (N-carboxymethyl)-1,4-ethylene piperazinium or its hydrazide, and 1,4-ethylene piperazine of the general formula (see above formula) where n is ranging from 40 % to 90 % of total number of cells; m is ranging from 3 % to 40 % of total number of cells; and n + m + 1 = 100 %. L'invention concerne un procédé de production de préparations de ferments immobilisées, et notamment la production et l'utilisation d'un nouveau conjugué actif de ferment ayant un excipient polymère. Ce conjugué a les propriétés d'une préparation de Longidaza et agit sur l'hyperplasie de tissus conjonctifs, possède également une action anti-inflammatoire, et peut être utilisé pour la production et l'utilisation de préparations médicamenteuses stables, actives et sans danger ayant une action prolongée sous forme de suppositoires, de baume, d'injection ou de crème cosmétique, ainsi que pour la production d'agents médicamenteux à usage vétérinaire. Ce procédé comprend la conjugaison de hyaluronidase avec un copolymère de carbodiimide soluble dans l'eau ou un procédé azide. On utilise pour le conjugué un copolymère de N-oxyde1,4-éthylène piperazine, (N-carboxyméthylméthyl )-1,4-éthylène piperazine ou un hydrazide de celui-ci, et du 1,4-éthylène piperazine correspondant à la formule générale (I) où n varie de 40% à 90% par rapport à la quantité totale liaisons et m varie de 3% à 40% par rapport à la quantité totale liaisons, n+m+l=100 %.