METHODS OF PRODUCING MOGROSIDES AND COMPOSITIONS COMPRISING SAME AND USES THEREOF

Isolated mogroside and mogrol biosynthetic pathway enzyme polypeptides useful in mogroside biosynthesis are provided. Mogroside biosynthetic pathway enzymes of the invention include squalene epoxidase (SE), expoxy hydratase (EH), cytochrome p450 (Cyp), cucurbitadienol synthase (CDS) and udp-glucosyl-transferase (UGT), Also provided are methods of producing a mogroside using the isolated mogroside and mogrol biosynthetic enzyme polypeptides, the methods comprising contacting a mogrol and/or a glycosylated mogrol (mogroside) with at least one UDP glucose glucosyl transferase (UGT) enzyme polypeptide of the invention catalyzing glucosylation of the mogrol and/or the glucosylated mogrol to produce a mogroside with an additional glucosyl moietie(s), thereby producing the mogroside. Alternatively or additionally provided is a method of synthesizing a mogrol, the method comprising contacting a mogrol precursor substrate with one or more mogrol biosynthetic pathway enzyme polypeptides as described herein catalyzing mogrol synthesis from the mogrol precursor substrate, thereby synthesizing the mogrol. L'invention concerne un mogroside isolé et des polypeptides enzymatiques de la voie de biosynthèse du mogrol utiles dans la biosynthèse de mogrosides. Les enzymes de la voie de biosynthèse de mogrosides de l'invention comprennent la squalène époxydase (SE), l'époxy hydratase (EH), le cytochrome p450 (Cyp), la cucurbitadiénol synthase (CDS) et l'udp-glucosyl-transférase (UGT). L'invention concerne également des procédés de production d'un mogroside à l'aide du mogroside isolé et des polypeptides enzymatiques de biosynthèse du mogrol, les procédés consistant à mettre en contact un mogrol et/ou un mogrol glycosylé (mogroside) avec au moins un polypeptide enzymatique de type UDP-glucose glucosyl transférase (UGT) de l'invention, qui catalyse la glucosylation du mogrol et/ou du mogrol glucosylé pour produire un mogroside présentant un/des fragment(s) glucosyle supplémentaire(s), ce qui permet de produire le mogroside. En variante ou en plus, l'invention concerne un procédé de synthèse d'un mogrol, le procédé consistant à mettre en contact un substrat de précurseur de mogrol avec un ou plusieurs polypeptide(s) enzymatique(s) de la voie de biosynthèse du mogrol tel(s) que décrit(s) dans la description, qui catalyse(nt) la synthèse du mogrol à partir du substrat de précurseur de mogrol, ce qui permet de synthétiser le mogrol.