PLANT-BASED RECOMBINANT BUTYRYLCHOLINESTERASE PRODUCTION METHODS

A new, reliable, easily scalable and reproducible method for the production of recombinant butyrylcholinesterase (rBuChE) is provided. Through the utilization of a plant transfection procedure, various plant strains have been shown to generate effective and scalable amounts of rBuChE under acceptable manufacturing processes to permit reliable levels of such enzymes for desired nerve agent protection requirements (including tetrameric products). As well, such methods in engineered plant lines have shown suitable production of these enzymes in tetramer form with glycan formation and sialyalation (for terminal groups) to allow for optimal potency against organophosphorus agent exposure as well as proper immunogenic response within the plant sources. The overall production method, including the transfection and production within mammalian cells, as well as the process steps involved for such a reliable sourcing platform from plants is thus encompassed within the invention. L'invention concerne un nouveau procédé fiable, facilement modulable et reproductible pour produire une butyrylcholinestérase (rBuChE) recombinante. L'utilisation d'une procédure de transfection de plante permet de montrer que, des souches de plantes variées génèrent des quantités efficaces et modulables de rBuChE dans des procédés de production acceptables afin d'obtenir des niveaux fiables de ces enzymes pour des exigences de protection d'agents neurotoxiques désirés (notamment, des produits tétramères). Ces procédés, dans les lignées végétales modifiées, ont également montré une production appropriée de ces enzymes sous forme tétramère avec formation de glycanes et sialylation (pour groupes terminaux) pour permettre une action optimale contre une exposition à un agent organophosphoreux ainsi qu'une réponse immunogène appropriée à l'intérieur des sources végétales. Le procédé de production globale met en uvre la transfection et la production à l'intérieur de cellules de mammifères ainsi que les étapes du procédé impliqué dans cette plate-forme d'approvisionnement fiable à partir de plantes.