RAPID AND ACCURATE ANALYSIS OF PROTEIN SIALYLATION

The invention relates to methods and kits for the analysis of the sialylation of gluco-proteins. The samples of gluco-protein are incubated separately under three conditions: with beta-galactosidase, with beta-galactosidase + alpha-sialidase, and without an enzyme. After the enzyme treatment, high p...

Ausführliche Beschreibung

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Hauptverfasser: WEE, KEVIN, WANG, ZIHAO, SLOAN, JESSICA
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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Beschreibung
Zusammenfassung:The invention relates to methods and kits for the analysis of the sialylation of gluco-proteins. The samples of gluco-protein are incubated separately under three conditions: with beta-galactosidase, with beta-galactosidase + alpha-sialidase, and without an enzyme. After the enzyme treatment, high performance anion exchange chromatography with pulsed amperometric detection (HPAEC PAD) is used to make a quantitative determination of the total galactose in the sample, the non sialylated galactose and the exogenous galactose in the medium. The determination of said values makes it possible to deduce the percentage of sialylation of the gluco-protein. L'invention concerne des méthodes et des trousses pour l'analyse de la sialylation de glucoprotéines. Les échantillons de glucoprotéines incubent de manière séparée dans trois conditions: avec de la beta-galactosidase, avec de la beta-galactosidase + l'alfa-sialydase, et sans enzyme. Après le traitement enzymatique, on détermine quantitativement au moyen de la chromatographie d'échange anionique à haute résolution avec détection ampérométrique pulsée (HPAEC PAD) la galactose totale dans un échantillon, la galactose non sialylatée et la galactose exogène du milieu. La détermination de ces valeurs permet de déduire le pourcentage de sialylation de la glucoprotéine.