IN-SITU HYBRIDIZATION METHOD USING RECA PROTEIN AND RECA PROTEIN HAVING MARKER OR LIGAND FOR USE IN SAID METHOD

A method for detecting the presence of a double-stranded target nucleic acid sequence contained in fixed cells or cell structures is provided. The method includes the steps of forming the fixed cells or cell structures by fixing cells or cell structures so as to allow a nucleic acid probe to enter, and forming a probe/RecA complex in which a single-stranded probe and RecA protein are stably bound to each other. The probe/RecA complex is allowed to react with the double-stranded target nucleic acid sequence to bind thereto under conditions in which the double-stranded target nucleic acid sequence is not denatured, and by detecting the RecA protein included in the probe/RecA complex, the presence of the double-stranded target nucleic acid sequence is detected. The invention provides a diagnostically important method by which the position of a specific gene or its regulatory region in a chromosome and the presence of a nucleic acid sequence derived from virus can be measured or visualized with high sensitivity and with ease. L'invention concerne un procédé permettant de détecter la présence d'une séquence nucléotidique cible d'un acide nucléique bicaténaire dans une cellule ou une structure cellulaire immobilisée. Ledit procédé consiste à immobiliser une cellule ou une structure cellulaire de façon à permettre la pénétration d'une sonde à l'acide nucléique, et à préparer un composite sonde-RecA comprenant une sonde monocaténaire et une protéine RecA liées mutuellement de façon stable. La présence d'une séquence nucléotidique cible d'acide nucléique bicaténaire est détectée par liaison du composite sonde-RecA à une séquence nucléotidique cible d'un acide nucléique bicaténaire, la réaction entre le composite et la séquence nucléotidique se faisant dans des conditions telles que la séquence nucléotidique cible ne subit aucune dénaturation, et par détection de la protéine RecA contenue dans ledit composite. L'invention offre un procédé diagnostique important permettant de déterminer ou de visualiser facilement, avec une haute sensibilité, la position d'un gène spécifié ou d'une région régulatoire de ce gène dans un chromosome, ou bien la présence d'une séquence nucléotidique d'origine virale.