MÉTODOS PARA PRODUÇÃO DE UMA BIBLIOTECA DE PARES COGNATOS QUE COMPREENDE SEQUÊNCIAS LIGADAS QUE CODIFICAM REGIÕES VARIÁVEIS E PARA GERAR UM VETOR QUE CODIFICA UM ANTICORPO QUIMÉRICO COM REGIÕES DE SERES HUMANOS CONSTANTES E REGIÕES VARIÁVEIS NÃO HUMANAS, BIBLIOTECA DE VETORES, E MÉTODO PARA PRODUÇÃO DE UMA BIBLIOTECA DE SEQUÊNCIAS DE IMUNOGLOBULINA DERIVADAS DE AVES

MÉTODOS PARA PRODUÇÃO DE UMA BIBLIOTECA DE PARES COGNATOS QUE COMPREENDE SEQUÊNCIAS LIGADAS QUE CODIFICAM REGIÕES VARIÁVEIS E PARA GERAR UM VETOR QUE CODIFICA UM ANTICORPO QUIMÉRICO COM REGIÕES DE SERES HUMANOS CONSTANTES E REGIÕES VARIÁVEIS NÃO HUMANAS, BIBLIOTECA DE VETORES, E MÉTODO PARA PRODUÇÃO...

Ausführliche Beschreibung

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: LARS SOEGAARD NIELSEN, ANNE MARIE VALENTIN JENSEN, KLAUS KOEFOED, METTE THORN, ALLAN JENSEN, CHARLES PYKE
Format: Patent
Sprache:por
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Beschreibung
Zusammenfassung:MÉTODOS PARA PRODUÇÃO DE UMA BIBLIOTECA DE PARES COGNATOS QUE COMPREENDE SEQUÊNCIAS LIGADAS QUE CODIFICAM REGIÕES VARIÁVEIS E PARA GERAR UM VETOR QUE CODIFICA UM ANTICORPO QUIMÉRICO COM REGIÕES DE SERES HUMANOS CONSTANTES E REGIÕES VARIÁVEIS NÃO HUMANAS, BIBLIOTECA DE VETORES, E MÉTODO PARA PRODUÇÃO DE UMA BIBLIOTECA DE SEQUÊNCIAS DE IMUNOGLOBULINA DERIVADAS DE AVES. A invenção refere-se a um procedimento para a ligação de pares cognatos de sequências que codificam VH e VL a partir de uma população de células aviárias enriquecidas em marcadores particulares de superfície de antígenos. O procedimento de ligação envolve um procedimento de amplificação molecular múltipla capaz de ligar sequências de nucleotídeos de interesse em relação à amplificação (PCR múltipla). O método é particularmente vantajoso para a geração de bibliotecas de pares cognatos, bem como bibliotecas combinatórias, sequências que codificam regiões variáveis de anticorpos de frangos ou outras aves. A invenção também proporciona métodos para a geração de anticorpos quiméricos humanos/aviários e bibliotecas de expressão geradas por tais métodos. The invention relates to a procedure for linking cognate pairs of VH and VL encoding sequences from a population of avian cells enriched in particular surface antigen markers. The linking procedure involves a multiplex molecular amplification procedure capable of linking nucleotide sequences of interest in connection with the amplification (multiplex PCR). The method is particularly advantageous for the generation of cognate pair libraries as well as combinatorial libraries of antibody variable region encoding sequences from chickens or other birds. The invention also provides methods for generation of chimeric human/avian antibodies and expression libraries generated by such methods.