cepa h. polymorpha, e processo para a fabricação de etanol

cepa fi. polymorpha, processo para a fabricação de e- tanol e ácido nucléico recombinante os genes swa2 e gami ãa ievedura, schwanniomyces occidentalis, que encoâifica (alfa)-arnilase e glucoamilase, respectivamente, foram clonados e expressos na h. polymorpha. a expressão foi obtida pela integração dos genes swa2 e gami no cromossomo de h. polymorpha sob iigação de modo operável a um promotor constitutivamente forte do gene de h. polymorpha - gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (hpgap). os transformantes resultantes adquiriram a habilidade de serem cultívados em um meio mínimo que contém amido soiúvel como única fonte de carbono e pode produzir etanol em fermentação de alta temperatura a partir do amido até 10 g/l. um gene xyn2 que encodifica a endoxilanase foi obtido a partir do fungo tríchoderma reseei, e um gene xlnd que codifica para a ss-xilosidase foi obtido a partir do fungo aspergillus niger.; a co-expressão destes genes foi também atingida pela integração no cromossomo de h. poiy-morpha sob o controle do promotor hpgap. os transformantes resultantes puderarn crescer em um meio mínimo suplementado com xilana de madeira de vidoeiro como única fonte de carbono. a expressão satisfatória de enzimas xilanolíticas resultou em uma cepa receptora que propicia a fermentação de xilana de madeira de vidoeiro em etanol a 48°c. além disso, com co-expressão dos genes precedentes em uma cepa de h. poiymorpha que expressam excessivamente um gene de piruvato descarboxilase melhorou ainda mais a produção de etanol. Genes SWA2 and GAM1 from the yeast, Schwanniomyces occidentalis, encoding α-amylase and glucoamylase, respectively, were cloned and expressed in H. polymorpha. The expression was achieved by integration of the SWA2 and GAM1 genes into the chromosome of H. polymorpha under operably linked to a strong constitutive promoter of the H. polymorpha-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase gene (HpGAP. Resulting transformants acquired the ability to grow on a minimal medium containing soluble starch as a sole carbon source and can produce Ethanol at high-temperature fermentation from starch up to 10 g/L. A XYN2 gene encoding endoxylanase was obtained from the fungus Trichoderma resee, and a xlnD gene coding for -xylosidase was obtained from the fungus Aspergillus niger. Co-expression of these genes was also achieved by integration into the H. polymorpha chromosome under control of the HpGAP promoter. The resulting transformants were capable of growth on a mini